融合表达白细胞介素10与卵清蛋白重组腺病毒口服变应原疫苗的构建及鉴定

摘要：

目的 构建免疫调节因子白细胞介素(IL)-10与模式变应原卵清蛋白(OVA)融合表达的重组腺病毒载体口服疫苗.方法 直接合成鸡IL-10及OVA的DNA序列后,采用重叠PCR法进行连接.连接序列插入穿梭质粒pHBAd-MCMV的多克隆区,获得重组穿梭质粒pAdIL-10-OVA.经测序鉴定后,pAdlL-10-OVA与腺病毒骨架质粒pHBAd-BHG共转染293细胞,包装获得重组腺病毒AdIL-10-OVA原代病毒,将原代病毒在293细胞中扩增到合适滴度.采用ELISA法检测细胞上清液中融合蛋白的表达水平.结果 重组穿梭质粒插入目标序列经测序鉴定正确,重组腺病毒载体疫苗rAdIL-10-OVA在293细胞中成功表达.结论 成功构建了融合表达IL-10与OVA的重组腺病毒载体疫苗AdIL-10-OVA,为后续动物实验验证其对变态反应性疾病的防治效应奠定了基础.

关键词：白细胞介素10、变应原、重组腺病毒、口服疫苗

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在线出版日期：2018-11-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：263-269