神经肽P物质对人牙髓干细胞生物学行为的影响

摘要：

目的 探讨神经肽P物质对人牙髓干细胞(hDPSC)生物学行为的影响.方法 组织块法分离、培养hDPSC,通过流式细胞术和茜素红染色鉴定hDPSC.用不同浓度的神经肽P物质[0(对照组)、0.1nmol/L、10 nmol/L、1 μmol/L、10μmol/L干预hDPSC,在第24、48、72和96h1通过细胞计数试剂盒8(CCK-8)法检测细胞增殖能力;在48 h时通过Transwell实验检测细胞迁移能力.成血管诱导条件下干预14 d后通过小管形成实验检测细胞成管情况;通过实时荧光定量反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测成管相关基因血管内皮生长因子受体2(VEGFR2)和血管内皮生长因子(VEGF)的表达情况.采用GraphPad Prism 8软件对数据进行统计学分析.结果 成功分离、培养hDPSC.流式细胞术结果显示,细胞表面标记物CD29、CD90、CD34和CD45表达率分别为99.90％、99.90％、0.40％和0.04％;茜素红结果显示,成骨诱导组形成较明显的矿化结节.CCK-8结果显示,对照组在48、72、96 h的相对增值率分别为(100.0±0.4)％、(100.0±0.7)％和(100.0±1.9)％,实验组在48 h时开始促进细胞增殖,72、96 h各浓度实验组均显著促进hDPSC的增殖,差异具有统计学意义(F48h=50.1,P48h＜0.001;F72h=323.5,P72h＜0.001;F96h=253.6,P96h＜0.001),最佳浓度10μmol/L时,48、72和96h1的细胞增殖率分别为(119.0±1.0)％、(148.4±3.5)％和(140.8±1.0)％;Transwell结果显示,与对照组穿膜数量(5.0±1.4)相比,实验组均对hDPSC的迁移具有促进作用(F=310.3,P＜0.001),最佳效应浓度为10 nmol/L,穿膜数量为(87.6±8.3);成血管诱导14 d后,小管形成实验结果显示,各浓度的P物质实验组与对照组相比均可促进hDPSC小管形成情况(F小管分支点数=43.7,P小管分支点数＜0.001;F相对小管长度=19.4,P相对小管长度=0.0001);RT-PCR结果显示,0、0.1 nmol/L、10 nmol/L、1 μmol/L、10 μmol/L实验组 VEGFR2的相对表达量分别为(1.000±0.023)、(1.129±0.076)、(1.474±0.101)、(1.285±0.055)和(1.213±0.160);VEGF 的相对表达量分别为(1.000±0.026)、(1.211±0.023)、(1.242±0.070)、(1.679±0.043)和(1.138±0.156),P物质组与对照组相比,差异均有统计学意义(FVEGFR2=10.43,PVEGFR2=0.001 4;FVEGF=29.87,PVEGF＜0.001).结论 P物质对hDPSC的增殖、迁移和成血管能力具有一定促进作用.

关键词：神经肽、P物质、牙髓干细胞、生物学行为、牙髓再生

所属期刊栏目：16

分类号：R730.2;R329.28;Q254

资助基金：广西研究生教育创新计划项目YCBZ2020055

在线出版日期：2023-02-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：343-351