整合素β1介导牙龈蛋白酶所致的小鼠成骨细胞周期阻滞

摘要：

目的 探讨整合素β1(Itgb1)在介导牙龈蛋白酶所致的小鼠成骨细胞周期阻滞中的作用.方法 8.348 U/L牙龈蛋白酶处理MC3T3-E1细胞12、24、36、48、60、72 h,细胞计数试剂盒(CCK-8)检测细胞增殖活性,含核糖核酸的碘化丙啶(PI/Rnase)染色检测细胞周期G0/G1、S、G2/M各期分布.蛋白免疫印迹法(Western blot)检测cyclin D1和CDK4蛋白表达水平.携带Itgb1基因的慢病毒转染MC3T3-E1细胞,构建Itgb1过表达稳转细胞株.所有数据采用SPSS 22.0统计软件包进行统计学分析.结果 CCK-8结果 显示,8.348 U/L牙龈蛋白酶处理成骨细胞12～72 h持续抑制细胞增殖.流式检测结果 发现,牙龈蛋白酶作用细胞12 h,停滞在G0/G1期的细胞比例由对照组(62.0±2.0)％升至(88.2±2.3)％,差异有统计学意义(F=35.218,P<0.001),S期细胞比例由对照组(36.8±6.2)％降至(5.9±2.3)％,差异有统计学意义(F=33.980,P<0.001).Western blot结果 表明,cyclin D1和CDK4的蛋白表达水平与对照组相比分别下调了65.0％(Fcyclin D1=60.294,Pcyclin D1<0.001)和40.3％(FCDK4=19.212,PCDK4=0.002).同时牙龈蛋白酶降低Itgb1表达,过表达Itgb1部分逆转牙龈蛋白酶所致的细胞周期阻滞,S期细胞比例由牙龈蛋白酶处理空载体组的(5.8±1.1)％恢复至(14.4±3.1)％,差异有统计学意义(F=39.226,P=0.017),cyclin D1和CDK4蛋白下调水平亦得到部分逆转(Fcyclin D1=61.740,Pcyclin D1=0.033;FCDK4=41.635,PCDK4=0.014).结论 Itgb1介导牙龈蛋白酶所致的小鼠成骨细胞细胞周期阻滞.

关键词：整合素β1、细胞周期、成骨细胞、慢性牙周炎、牙龈蛋白酶、牙龈卟啉单胞菌

所属期刊栏目：12

资助基金：国家自然科学基金81170970

在线出版日期：2018-09-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：213-220