重组人乳铁蛋白诱导人口腔癌Tca8113细胞自噬及凋亡

摘要：

目的 研究重组人乳铁蛋白(rhLF)对人口腔癌Tca8113细胞增殖及凋亡的影响.方法 MTT法检测不同浓度的rhLF作用细胞不同时间对其增殖的影响,并分别用不同浓度的rhLF处理细胞后观察其对集落克隆形成的影响;不同浓度的rhLF处理细胞后线粒体膜电位的变化.采用免疫荧光技术检测rhLF处理前后自噬体的形成情况.免疫蛋白印迹法(Western blot)检测不同浓度rhLF处理细胞后细胞自噬相关蛋白P62和LC3表达变化,AnnexinⅤ-PI双染色检测rhLF对细胞凋亡的影响;Western blot检测不同浓度的rhLF处理细胞后聚腺苷二磷酸-核糖聚合酶(PARP)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3)的表达变化.所有数据采用SPSS 13.0统计软件包进行统计学分析.结果 rhLF对口腔癌Tca8113细胞的增殖及存活有明显的增殖抑制作用,并呈药物浓度和时间依赖性,且各药物处理组与对照组相比有统计学意义(P<0.05).rhLF抑制口腔癌Tca8113细胞克隆形成;JC-1荧光检测显示口腔癌Tca8113细胞经rhLF处理后其线粒体膜电位下降;rhLF处理后形成自噬体,不同浓度rhLF处理细胞后细胞自噬相关蛋白P62表达下降及LC3-Ⅱ表达增加,0、100、200μg/ml的rhLF处理口腔癌Tca8113细胞48 h的凋亡率为3.9%、8.2%、42.6%,组间差异有统计学意义(P<0.05).Western blot结果显示,rhLF处理口腔癌Tca8113细胞后PARP、Caspase-3被激活.结论 rhLF能显著抑制Tca8113细胞的增殖并诱导其细胞凋亡,其机制与线粒体凋亡途径的激活应激有关.

关键词：口腔肿瘤、乳铁蛋白、重组蛋白类、细胞凋亡、聚腺苷二磷酸-核糖聚合酶、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3

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分类号：S81;R73

资助基金：广东省科技计划2013B021800049

在线出版日期：2018-01-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：346-353