牙龈卟啉单胞菌脂多糖诱导人牙髓细胞炎症反应中微小RNA的表达谱变化

摘要：

目的 研究牙龈卟啉单胞菌脂多糖(Pg-LPS)诱导人牙髓细胞(hDPC)炎症反应中微小RNA(miRNA)表达谱的变化.方法 体外分离培养hDPC,10μg/ml Pg-LPS处理hDPC 0、3、6、12、24 h,实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)和ELISA检测炎症因子白细胞介素6(IL-6)、IL-8 mRNA及蛋白表达量.Illumina HiSeqTM 2500测序检测Pg-LPS刺激前后miRNA表达模式,筛选差异miRNA并预测其靶基因,对靶基因进行KEGG通路和GO功能富集分析.采用t检验或单因素方差分析等进行统计分析.结果 Pg-LPS刺激hDPC,IL-6和IL-8的mRNA表达量及细胞上清蛋白含量显著升高,其中IL-6和IL-8 mRNA在3 h表达升高最明显,分别为(7.4±1.1)、(61.6±20.8)倍,差异有统计学意义(tIL-6=-9.268,PIL-6=0.001;tIL-8=-5.047,PIL-8=0.037).IL-6和IL-8的分泌呈时间依赖性增加,24 h时含量分别为(44±19)、(4016±670)pg/ml,差异有统计学意义(tIL-6=-3.621,PIL-6=0.022;tIL-8=-4.902,PIL-8=0.008).hDPC经LPS刺激后共检测出680个miRNA表达有变化,其中2个下调的miRNA和18个上调的miRNA为差异miRNA,功能富集分析显示差异miRNA参与调控多条炎症或损伤修复相关的信号通路如Wnt信号通路、TGF-β信号通路、PI3K-Akt信号通路、MAPK信号通路等.结论 Pg-LPS可诱导hDPC发生炎症反应,此过程中miRNA表达谱发生变化,提示miRNA可能参与Pg-LPS诱导的hDPC炎症反应.

关键词：牙龈卟啉单胞菌、脂多糖类、牙髓、炎症因子、微小RNA

所属期刊栏目：11

分类号：R78;R32

资助基金：国家自然科学基金81771058

在线出版日期：2018-01-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：333-340