NELL-1调控RUNX2的P1启动子诱导成骨分化

摘要：

目的 探讨骨生长因子Nel样蛋白1(NELL-1)与骨核心转录因子RUNX2之间的调控机制.方法 构建并产生含RUNX2的P1启动子和绿色荧光蛋白报告基因的慢病毒,感染小鼠骨髓间充质细胞系M2-10B4细胞,通过流氏细胞仪检测绿色荧光蛋白细胞记数值,观察不同浓度外源NELL-1蛋白对RUNX2的P1启动子的调控作用.茜素红染色半定量法检测NELL-1促进M2-10B4细胞成骨作用以及实时定量聚合酶链反应(PCR)检测NELL-1蛋白对小鼠M2-10B4细胞成骨相关基因表达的影响.采用单因素方差分析数据.结果 当加入800和1600 ng/ml NELL-1蛋白时,NELL-1蛋白组绿色荧光蛋白细胞记数值分别较对照组增高82.09%、92.36%,且差异均有统计学意义(FN800=26.979,PN800<0.05;FN1600=28.410,PN1600<0.01).茜素红染色定量检测结果表明,800 ng/ml NELL-1组小鼠M2-10B4细胞较对照组产生的矿化结节升高约73.41%,差异具有统计学意义(FN800=31.179,PN800<0.01).实时定量PCR结果显示,NELL-1蛋白促进成骨相关基因骨核心转录因子RUNX2、骨桥蛋白(OPN)、骨钙蛋白(OCN)和碱性磷酸酶(ALP)表达上调.结论 NELL-1蛋白可以通过调控RUNX2的P1启动子促进RUNX2表达诱导骨髓间充质细胞成骨分化.

关键词：骨髓、基质细胞、小鼠、NELL-1基因、成骨分化、慢病毒属载体

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分类号：S51;S31

资助基金：国家自然科学基金81400491;广东省医学科研基金A2014254;中山大学高校青年教师培育项目15ykpy41

在线出版日期：2017-09-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：197-203