10.3877/cma.j.issn.1674-1366.2017.03.001
肌切蛋白adseverin对小鼠成牙本质细胞增殖、迁移及矿化作用的影响
目的 通过构建沉默肌切蛋白(adseverin)的成牙本质细胞模型,探索肌切蛋白对成牙本质细胞MDPC-23增殖、迁移及矿化能力的影响.方法 构建沉默表达肌切蛋白的慢病毒载体质粒,转染MDPC-23细胞,获得肌切蛋白沉默表达的稳定转染细胞模型.空载体转染细胞及未转染细胞作为对照组,蛋白印迹法(Western blot)检测肌切蛋白干扰效率,细胞计数(CCK-8)法检测细胞的增殖情况,Transwell小室实验观察细胞迁移率,碱性磷酸酶(ALP)试剂盒及茜素红染色检测细胞矿化差异.采用单因素方差分析对数据进行统计分析,LSD-t检验进行两两比较.结果 成功构建肌切蛋白沉默表达的细胞模型,CCK-8结果 显示沉默肌切蛋白后,MDPC-23细胞的增殖率在48和72 h时分别下降26.8%(F48 h=11.025,P=0.01)和26.5%(F72 h=86.205,P<0.001);Transwell结果 显示,沉默肌切蛋白后,MDPC-23细胞迁移能力降低61.2%(F=6.005,P=0.008);干扰肌切蛋白后MDPC-23细胞ALP活性明显升高,约为空载体组的4倍(ALP干扰组=568.43 U/gprot,ALP空载体组=142.56 U/gprot,ALP空转染组=118.16 U/gprot;F=49.002,P<0.001),矿化结节形成量高于对照组.结论 肌切蛋白可能参与成牙本质细胞MDPC-23的增殖、迁移及矿化过程.
肌切蛋白、MDPC-23、细胞增殖、细胞运动、矿化
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R73;R39
2017-07-03(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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