不同浓度重组人骨形成蛋白2对人胎盘间充质干细胞增殖和碱性磷酸酶表达的影响

摘要：

目的 初步探讨重组人骨形成蛋白2(rhBMP-2)作用于人胎盘间充质干细胞(HPDMSCs)的适宜浓度范围.方法 取健康产妇自愿捐赠的胎盘,采用胶原酶消化法分离HPDMSCs,体外培养扩增并鉴定.取第3代HPDMSCs,根据培养液中加入rhBMP-2浓度的不同分为对照组(rhBMP-2浓度为0)和实验A、B、C、D组(rhBMP-2浓度分别为50、100、150、200 ng/ml).在加药后4、8、12、16d采用CCK-8法检测各组细胞增殖的吸光度值A450,碱性磷酸酶(ALP)定量检测法检测酶表达的吸光度值A520.结果 获得的HPDMSCs呈长梭形.CD29、CD44、CD105表达阳性,CD34、CD45、CD106、HLA-DR表达阴性.经鉴定,分离培养的细胞具有成骨和成脂的多向分化能力.CCK-8实验结果显示:A、B、C组A450与对照组相比,在所有时间点下差异均无统计学意义(P＞0.05)；D组A450低于其它组,差异在大部分时间点有统计学意义(P＜0.05).ALP检测结果显示:A、B、C、D组A520在所有时间点均高于对照组(P＜0.01)；B、C组在8、12、16 d高于其它组(P＜0.05)；B、C组在所有时间点差异无统计学意义(P＞0.05).结论 rhBMP-2浓度在100～150 ng/ml范围可有效诱导HPDMSCs成骨向分化,且对HPDMSCs增殖不产生明显影响.

关键词：重组人骨形成蛋白2、人胎盘间充质干细胞、增殖、碱性磷酸酶

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分类号：X52;TF4

资助基金：教育部高等学校博士学科点专项科研基金20070558268;广东省科技计划2008B030301108

在线出版日期：2012-12-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：14-18