胚鼠腭突细胞转化生长因子β3基因的RNA干扰及对TGFβ-Smad信号通路的影响

摘要：

目的 探讨在胚鼠腭突培养细胞中应用StealthTM RNAi转染有效沉默转化生长因子β3(TGFβ3)基因的可行性.方法 采用Bal b/c近交系小鼠在交配后第14天取胚鼠腭突,离散后进行细胞培养,应用相差显微、MTT法观察传代细胞的形态和生物学特性.采用化学合成的StealthTM RNAi抑制原代胚鼠腭突上皮细胞和间充质细胞内源性TGFβ3 mRNA表达,检测作用24、48、72 h后,TGFβ3、Smad2、BMP2三种基因的表达情况.结果 经过本实验设计的StealthTM RNAi干扰的胚鼠腭突培养细胞中,TGFβ3基因的mRNA和蛋白表达明显降低,但沉默效果随时问有减弱趋势.Smad2基因的mRNA和蛋白表达均随着TGFβ3基因的沉默而减低;但BMP2基因的表达无显著性的改变.结论 StealthTM RNAi能有效地沉默TGFβ3阳基因,并下调Smad2基因的表达,但对BMP2基因表达无明确影响.

关键词：腭裂、TGFβ3基因、Smad2基因、信号通路、RNA干扰

所属期刊栏目：5

分类号：R78;R32

在线出版日期：2011-05-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共11页

页码：26-36