两型腺相关病毒对培养人牙髓细胞转染效率的研究

摘要：

目的 探讨两种不同腺相关病毒(AAV)介导的增强型绿色荧光蛋白rAAV2-EGFP和rAAV2/1-EGFP对人牙髓细胞的转染效率及对人牙髓细胞的毒性,为AAV携带目的基因治疗提供理论依据与实验基础.方法 采用组织块加酶消化法培养人牙髓细胞并鉴定组织来源.按照感染复数(MOI)为104、105、5 × 105转染第2代人牙髓细胞,并选择最适MOI值;流式细胞仪检测转染后7 d,rAAV2-EGFP和rAAV2/1-EGFP对人牙髓细胞的转染效率;MTT法检测AAV2-EGFP,AAV2/1-EGFP转染后4、6、8、10、12 d人牙髓细胞的增殖活性.结果 荧光显微镜下观察rAAV-EGFP对人牙髓细胞的转染效率及荧光蛋白强度,随着MOI值的增加而增高,其中105为转染最适MOI值,7 d时,流式细胞仪检测AAV2-EGFP、AAV2/1-EGFP转染率分别为35.8%、76.9%;病毒转染细胞后,细胞生长正常,MTT显示转染后各转染组与未转染组的吸光度值差异无统计学意义.结论 rAAV2-EGFP对体外培养的人牙髓细胞转染效率高于rAAV2/1-EGFP,是腺相关病毒中转染人牙髓细胞比较适合的载体.

关键词：腺相关病毒、人牙髓细胞、成纤维细胞、转染

所属期刊栏目：3

分类号：R65;R32

资助基金：广东省科技计划项目2007B031000002

在线出版日期：2009-07-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：237-243