骨形成蛋白-2基因克隆及真核表达重组子的构建

摘要：

目的 探讨人骨形成蛋白-2(BMP-2)全长基因的克隆,及其真核表达重组子构建方法.方法 采用Trizol法从人髁状突骨组织中提取制备总RNA,利用逆转录技术转录出BMP-2 cDNA,以其为模版,PCR扩增出BMP-2全长基因,与真核表达载体pcDNA3.1(+)连接,构建真核表达重组子pcDNA3.1(+)/BMP-2,经酶切和序列分析鉴定重组子的构建情况.结果 PCR扩增产物在1 200 000处有扩增条带,与目的 基因大小相符,重组质粒经限制性内切酶HindⅢ和XbaⅠ双酶切后,得到5 400 000和1 200 000的 BMP-2条带,BMP-2基因已成功克隆且成功与pcDNA3.1(+)连接.结论 成功克隆出人BMP-2基因,并构建其真核表达重组子pcDNA3.1/BMP-2,为进一步研究BMP-2的功能、BMP-2基因在骨髓间充质细胞(hMSCs)中表达以及在骨组织工程中的应用研究奠定了基础.

关键词：骨形成蛋白-2、基因克隆、真核表达载体

所属期刊栏目：2

分类号：R73;R31

资助基金：广东省科技厅项目007B060401069;广州市科技局攻关项目2007Z3-E0191;广州市教育局项目61105

在线出版日期：2009-04-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：452-456