猪牙胚釉原蛋白成熟肽基因原核表达克隆的构建

摘要：

目的 克隆猪釉原蛋白(pAm)成熟肽编码区基因片段,并构建含有该基因的重组原核表达质粒,为制备基因工程化的重组pAm奠定基础.方法 从新生小猪牙胚组织中抽提总RNA,逆转录合成牙胚cDNA,通过PCR扩增pAm成熟肽编码序列(约540 bp),所得目的 基因插入表达载体质粒PGEX4T1,转化大肠杆菌DH5α.重组质粒PGEX4T1-pAm经双酶切和核苷酸序列分析鉴定.结果 重组质粒PGEX4T1-pAm经双酶切和测序鉴定证实载体质粒PGEX4T1中插入的基因片段与pAm成熟肽基因序列完全相同.结论 从发育期猪牙胚组织中克隆到釉原蛋白成熟肽编码序列可成功构建含有pAm成熟肽基因的重组表达质粒.

关键词：釉原蛋白、逆转录聚合酶链式反应、重组质粒

所属期刊栏目：2

分类号：R78;R73

资助基金：国家自然科学基金30672315

在线出版日期：2008-09-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：116-121