人乳牙和恒牙牙髓干细胞中唾液腺分泌相关分子的表达比较

摘要：

目的 探讨人乳牙牙髓干细胞(stem cells from the pulp of human exfoliated deciduous teeth,SHED)和恒牙牙髓干细胞(dental pulp stem cells,DPSC)的一般生物学特性及与唾液腺分泌相关分子的表达差异,为使用SHED或DPSC治疗唾液腺分泌功能低下提供依据.方法 分别培养SHED和DPSC至第4、7代,使用组织块法原代培养人下颌下腺上皮和间质细胞,使用相差显微镜观察细胞形态;使用流式细胞术检测干细胞表面标志物;分别使用细胞计数试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8)、长时间动态活细胞成像及数据分析系统IncuCyte ZOOM检测细胞增殖;使用实时荧光定量PCR检测与分泌相关的分子表达.结果 第4和7代SHED及DPSC均呈长梭形贴壁生长.4组细胞均阳性表达间充质干细胞表面标志物CD29、CD44、CD73和CD90,阴性表达上皮干细胞标志物CD49f和CD117.4组细胞增殖无差异.与第4代SHED相比,第7代SHED中与水分泌相关的毒蕈碱型乙酰胆碱受体1(muscarinic acetylcholine receptor 1,MR1)和MR3、水通道蛋白5(aquaporin 5,AQP5),与蛋白质分泌相关的β1-肾上腺素受体(β1-adrenoceptor,β1-AR)及分泌蛋白α-淀粉酶和黏蛋白5B的表达差异均无统计学意义(P>0.05),β2-AR的表达显著降低(P<0.05).与第4代DPSC相比,第7代DPSC中MR3、β2-AR和α-淀粉酶表达差异无统计学意义(P>0.05),而MR1、AQP5、β1-AR和黏蛋白5B表达降低(P<0.05).与1例同年龄段人的下颌下腺组织及其原代上皮细胞相比,第4和7代SHED中各分子表达均低.与同年龄段人的下颌下腺原代上皮细胞相比,第4代DPSC中AQP5表达显著降低(P<0.05),其他分子表达差异无统计学意义(P>0.05);第7代DPSC中AQP5、β1-AR、α-淀粉酶和黏蛋白5B表达显著降低(P<0.05),其他分子表达差异无统计学意义(P>0.05).第4和7代DPSC中各分子的表达均显著低于人下颌下腺组织中的表达(P<0.01).结论 与DPSC相比,SHED生长稳定,与唾液腺水和蛋白质分泌相关的分子表达较低;SHED可成为唾液腺组织工程及治疗唾液腺分泌功能低下的种子细胞,且第4至7代SHED均可用于实验研究.

关键词：干细胞、乳牙牙髓干细胞、恒牙牙髓干细胞、唾液腺、分泌

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资助基金：国家自然科学基金81771088 National Natural Science Foundation of China 81771088

在线出版日期：2018-11-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：741-747