曲古抑菌素A对肿瘤坏死因子α诱导的炎症微环境下牙周膜干细胞成骨分化能力的影响

摘要：

目的 观察肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)诱导的炎症微环境下牙周膜干细胞(periodontal ligament stem cells,PDLSC)中组蛋白去乙酰化酶(histone deacetylases,HDAC)家族的表达变化,探究HDAC抑制剂曲古抑菌素A(trichostatin A,TSA)干扰HDAC功能后对PDLSC成骨分化能力的影响.方法 收集新鲜健康的离体牙牙周膜组织,分离培养PDLSC.采用实时定量PCR技术检测对照组及TNF-α(10 μg/L)刺激下HDAC1～11的表达变化;甲基噻唑基四唑(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)法检测TSA(50 nmol/L)对PDLSC增殖能力的影响,对照组加正常细胞培养液,TNF-α组加含TNF-α的细胞培养液,TSA组加含TNF-α及TSA的细胞培养液;分别采用茜素红染色、实时定量PCR技术和蛋白质印迹法检测TSA对炎症微环境下PDLSC成骨分化能力的影响,对照组加正常成骨诱导液,TNF-α组加含TNF-α的成骨诱导液,TSA组加含TNF-α及TSA的成骨诱导液.结果 除HDAC7外,TNF-α组HDAC的表达均显著高于对照组(P＜0.05);50 nmol/L TSA对PDLSC的增殖能力无显著影响(P=0.232);茜素红染色显示TNF-α组PDLSC较对照组基质矿化显著减少,而TSA组细胞矿化能力明显提高;与对照组(设为1.0)相比,TNF-α组PDLSC成骨相关基因核心结合蛋白因子2(runt-related transcription factor-2,RUNX2)、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP) mRNA的相对表达量分别为0.17±0.02、0.32±0.03,TSA组RUNX2、ALP mRNA的表达量(分别为0.67±0.03、0.89±0.02)均显著高于TNF-α组(P＜0.01);蛋白质印迹法结果显示,TNF-α组PDLSC成骨相关蛋白的表达较对照组明显减少,与TNF-α.组相比,TSA可以明显促进炎症微环境下细胞成骨相关蛋白的表达.结论 炎症微环境下PDLSC高表达HDAC,应用TSA抑制HDAC后可显著提高炎症环境下PDLSC的成骨分化能力.

关键词：牙周膜、干细胞、组蛋白脱乙酰基酶类、曲古抑菌素A、成骨分化

所属期刊栏目：51

分类号：R737.31;R318.17;R681.1

在线出版日期：2016-05-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：235-241