腺病毒介导的人骨形成蛋白7基因转染对人牙髓细胞增殖与分化作用的研究

摘要：

目的 探讨腺病毒介导的人骨形成蛋白7(Ad-hBMP-7)转染对体外培养的人牙髓细胞增殖及向成牙本质细胞分化的作用.方法 人胚肾293细胞扩增复制缺陷型重组腺病毒,选用细胞半数感染剂量法测定病毒滴度.体外培养人牙髓细胞,荧光显微镜观察增强型绿色荧光蛋白的表达,流式细胞仪检测病毒的转染率.将Ad-hBMP-7感染人牙髓细胞,Western blot检测蛋白表达情况,噻唑蓝比色法(MTT)、酶动力学法、von Kossa染色及半定量逆转录聚合酶链分别检测转基因细胞的增殖、碱性磷酸酶(ALP)活性、钙化结节的形成和牙本质涎磷蛋白(DSPP)mRNA的表达.结果 病毒滴度为1.785×1012 pfu/L;人牙髓细胞受Ad-hBMP-7感染48 h后即可检测到外源蛋白表达;当感染复数为75时,重组腺病毒对牙髓细胞的转染率达(91.1±1.0)%;与空载体组及未转染细胞组相比,细胞的增殖特性无明显改变;ALP活性高于对照组(P＜0.05);能够形成矿化结节;DSPP mRNA的表达呈剂量和时间依赖性.结论 Ad-hBMP-7可促进体外培养的人牙髓细胞向成牙本质细胞分化,但对细胞的增殖无明显改变.

关键词：细胞分化、转染、腺病毒载体、骨形成蛋白

所属期刊栏目：41

分类号：R78(口腔科学)

资助基金：广东省自然科学基金5001721

在线出版日期：2006-11-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：612-615