目的:探讨微小RNA132(microRNA132,miRNA-132)调控阿尔茨海默病(Alzheimer′s disease,AD)模型鼠(AD模型鼠)神经元凋亡的分子机制。方法:本研究起止时间为2016年1月至2021年3月,动物分组为AD转基因模型鼠组(AD模型鼠组)和同窝阴性对照鼠组(同窝阴性鼠组),后续实验中的每组动物数量均为3只;采用定量多聚酶链反应(quantitative polymerase chain reaction,qPCR)方法检测2组小鼠皮质和海马组织中的miRNA-132表达水平,采用脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(terminal-deoxynucleotidyl transferase mediated nick end labeling,TUNNEL)检测2组小鼠脑组织皮质神经细胞凋亡情况,采用免疫印迹法检测2组小鼠全脑组织中的凋亡相关蛋白的表达水平,采用双荧光酶报告系统确认miRNA-132直接调控的下游靶点蛋白。2组实验数据比较采用独立样本
t检验,以
P<0.05 为差异有统计学意义。
结果:与同窝阴性鼠组相比,AD模型鼠组皮质和海马的miRNA-132表达水平均明显下调(
P<0.01),脑皮质神经元凋亡显著增加(
P<0.01),全脑组织凋亡相关蛋白BAX、Caspase-3、FOXO3a均明显上升(
P<0.05或
P<0.01);双荧光酶报告系统显示miRNA-132可以和下游蛋白FOXO3a直接相互作用,AD模型组的荧光素酶活性明显降低(
P<0.01)。
结论:miRNA-132表达下降诱导了AD鼠神经元凋亡,机制可能是通过上调FOXO3a的表达,激活凋亡相关蛋白BAX和Caspase-3实现的。
阿尔茨海默病、细胞凋亡、小鼠
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国家自然科学基金U1504809,31571106;河南省医学科技攻关计划LHGJ20190478;河南省科技攻关项目212102310588;National Nature and Science Fund of ChinaU1504809, 31571106;Henan Province Medical Science and Technology Research PlanLHGJ20190478;Key R&D and Promotion Projects in Henan Province212102310588