血管内皮细胞Ddx24基因条件性敲除鼠构建以及对视网膜血管新生的影响

摘要：

目的 构建血管内皮细胞Ddx24基因条件性敲除小鼠(Cdh5-Cre×Ddx24flox/flox),并利用该模型探索Ddx24基因对小鼠胚胎发育和视网膜血管新生的影响,为进一步探讨DDX24基因在内脏血管畸形中发挥的功能作用和具体分子机制提供动物模型.方法 运用Cre-LoxP系统构建Ddx24基因的Flox修饰小鼠,并与血管内皮细胞特异性表达Cre酶的Cdh5-Cre小鼠进行繁育,以建立Cdh5-Cre×Ddx24flox/flox小鼠模型.利用PCR和琼脂糖凝胶电泳进行基因鉴定,然后利用Western blot或qPCR实验验证Cdh5-Cre×Ddx24flox/flox小鼠血管组织中DDX24蛋白和mRNA的表达改变,最后通过H&E染色和免疫荧光实验观察Cdh5-Cre×Ddx24flox/flox小鼠胚胎和视网膜血管发育的变化.结果 成功构建 Cdh5-Cre×Ddx24flox/flox 小鼠,并通过 Western Blot 和 qPCR 检测发现 Cdh5-Cre×Ddx24flox/flox小鼠血管组织中DDX24表达显著下降;在血管内皮细胞中敲除Ddx24基因后无胚胎致死性,可导致幼鼠视网膜血管新生异常增多.结论 利用Cre-LoxP系统获得Cdh5-Cre×Ddx24flox/flox小鼠,发现血管内皮细胞条件性敲除Ddx24基因可使幼鼠视网膜血管新生异常增多,为研究DDX24在内脏血管畸形中的作用提供了有效动物模型.

关键词：Ddx24、Cre-LoxP、视网膜血管新生、内脏血管畸形

所属期刊栏目：10

分类号：Q789;R732.2;R392.1

资助基金：国家自然科学基金;广东省自然科学基金项目;中山大学临床医学研究计划项目

在线出版日期：2023-02-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：429-435