脂肪间充质干细胞协同利拉鲁肽对小鼠急性肺损伤的保护作用

摘要：

目的:研究脂肪间充质干细胞（AD-MSC）在利拉鲁肽（Liraglutide）的协同作用下对脂多糖（LPS）诱导的小鼠急性肺损伤（ALI）的保护作用。方法:将体外培养的AD-MSC细胞悬液充分混匀后按照相同的细胞数量和体积分为3组：对照组、LPS组（30 mg/L）以及LPS（30 mg/L）+利拉鲁肽（10 nmol/L）组。MTT实验检测6、24、48、72 h时各组AD-MSC的增殖情况；AnnexinV-FITC/PI双染流式细胞术检测3组细胞的凋亡情况；体外培养72 h，Western blot检测3组细胞凋亡相关蛋白cleaved caspase-3、Bax及Bcl-2的表达。体内实验中将60只雄性SPF级BALB/c小鼠，按照随机数字表随机分为5组：对照组、急性肺损伤模型组（ALI组）、ALI+脂肪间充质干细胞组（ALI+AD-MSC组）、ALI+利拉鲁肽组（ALI+Liraglutide组）、ALI+脂肪间充质干细胞+利拉鲁肽组（ALI+AD-MSC+Liraglutide组），观察小鼠的一般情况，分别在LPS刺激造模后2 d和7 d取小鼠肺组织，HE染色检查小鼠肺部的病理变化，并进行肺损伤评分；免疫组织化学检测小鼠肺组织，观察间充质干细胞标志性蛋白Nanog的表达变化；收集小鼠BALF，瑞氏-姬姆萨染色法计数BALF中性粒细胞数量；测定小鼠肺组织湿/干比重（W/D）。结果:AD-MSC在LPS的刺激下细胞凋亡明显高于对照组（
P<0.05），在6、24、48和72 h的增殖作用明显低于对照组（均
P<0.05）。加入利拉鲁肽后改善了AD-MSC的凋亡（
P<0.05），促进了细胞在6、24、48和72 h的增殖作用。与对照组相比，在2 d和7 d模型组中，ALI组小鼠肺损伤病理严重，BALF中性粒细胞数量增多[分别为（65.63±1.34和1.74±0.17、51.67±1.35和1.55±0.13）×10
4 /ml（均
P<0.05）]，小鼠肺组织W/D增大。Nanog蛋白在7 d模型组中表达量少。与ALI组相比，在2 d和7 d模型组中，ALI+AD-MSC组、ALI+Liraglutide组以及ALI+AD-MSC+Liraglutide组小鼠肺损伤病理程度减轻；BALF中性粒细胞数量在ALI+AD-MSC组[（37.04±1.23、29.17±0.68）×10
4/ml（均
P<0.05）]、ALI+Liraglutide组[（39.58±1.67、35.42±0.25）×10
4/ml（均
P<0.05）]以及ALI+AD-MSC+Liraglutide组[（28.54±0.37、21.46±0.89）×10
4/ml（均
P<0.05）]也减少；肺组织W/D在ALI+AD-MSC组、ALI+Liraglutide组以及ALI+AD-MSC+Liraglutide组也表现出同样的趋势。Nanog蛋白在7 d模型组中表达量增加。
结论:脂肪间充质干细胞在利拉鲁肽的协同作用下对小鼠急性肺损伤起到保护作用。

关键词：急性肺损伤、间质干细胞、细胞凋亡、利拉鲁肽

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资助基金：国家自然基金81770075，81770039;National Natural Science Foundation of China81770075, 81770039

在线出版日期：2023-05-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：765-771