10.3760/cma.j.issn.1001-0939.2016.07.010
骨形态形成蛋白4通过受体Ⅱ/Smad信号通路对瞬时受体电位离子通道蛋白表达的影响
目的:观察骨形态形成蛋白(BMP)4对大鼠远端肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)内Smad信号通路的影响,探讨其对瞬时受体电位离子通道( TRPC )蛋白1和6的作用。方法雄性Wistar大鼠6只,体重280~300 g,显微分离远端肺动脉酶消化法原代培养高纯度PASMCs,检测BMP4对于Smad信号通路的激活,利用BMP受体Ⅱ(BMPRⅡ)的小干扰RNA(SiRNA),选择性抑制Smad信号通路,探讨BMP4/BMPRⅡ信号转导通路对TRPC1、6蛋白表达的影响,利用Western blot 技术检测蛋白表达量。结果 BMP4作用于大鼠远端PASMCs,可以迅速激活Smad信号通路,而后随时间的延长逐渐减弱。 BMPRⅡsiRNA转染大鼠远端 PASMCs,能够有效地沉默 BMPRⅡ蛋白表达, BMP4刺激转染后的PASMCs,Smad磷酸化水平较正常PASMCs低。 BMPRⅡsiRNA转染降低了BMP4对TRPC1、6蛋白的促表达作用,与转染NT-目标SiRNA相比,在转染BMPRⅡ SiRNA的PASMCs, BMP4处理后TRPC1蛋白表达与β-肌动蛋白的灰度值之比降低2.7倍( P<0.05);TRPC6蛋白表达与β-肌动蛋白的灰度值之比下降2.5倍( P<0.05)。结论 BMP4可通过结合大鼠远端PASMCs的BMPRⅡ激活Smad信号转导途径,上调TRPC1、6蛋白的表达。
骨形态形成蛋白4、Smad蛋白质类、离子通道
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R68;R31
国家自然科学基金青年科学基金项目81200037Fund programThe National Natural Science Foundation of China Youth Foud 81200037
2016-07-20(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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