17-丙烯胺基-17-去甲氧基格尔德霉素对人肺癌A549及H446细胞增殖和凋亡的影响

摘要：

目的 观察17-丙烯胺基-17-去甲氧基格尔德霉素(17-AAG)对人肺癌A549及H446细胞凋亡的影响,初步探讨其可能的作用机制.方法 实验组细胞分别使用浓度为50、100、200、400和500 nmol/L的17-AAG进行处理,以不经药物处理组为阴性对照,通过MTT法检测12、24、48及72 h4个时间段内17-AAG对A549及H446细胞增殖的影响.以不经药物处理组为阴性对照,通过流式细胞术检测浓度为100、200和400 nmol/L的17-AAG作用48 h后,对A549及H446细胞周期的影响及其促凋亡作用.以不经药物处理组为阴性对照,通过Western blot法检测浓度为100、200和400 nmol/L的17-AAG对A549及H446细胞内热休克蛋白(Hsp) 90相关蛋白(Hsp90、Hsp70、Akt和Her-2)和凋亡相关蛋白(Bcl-2和Bax)表达的影响.本研究中结果对比类计量资料以(-x)±s表示,采用Origin 8.0统计软件,多组间均数比较采用t检验,组间两两比较用单因素方差分析(One-way ANOVA).结果 17-AAG浓度为50～ 500 nmol/L时2个细胞株的增殖受抑制,呈显著的浓度依赖性.48 h时,17-AAG对A549及H446细胞的半抑制浓度(IC50)分别为(222±13)和(189 ±7) nmol/L;细胞周期实验结果发现,17-AAG可特异性地将A549及H446细胞株的细胞周期阻滞于G2/M期;凋亡实验结果显示,17-AAG可促进A549及H446细胞凋亡;17-AAG浓度为400 nmol/L处理48 h后,A549细胞株的细胞凋亡率为46.3％,H446细胞株的细胞凋亡率为56.9％,与未加药物处理的对照组相比(A549细胞株的细胞凋亡率为11.9％,H446细胞株的细胞凋亡率为6.9％)差异有统计学意义(P＜0.01);经17-AAG处理48 h后,2个细胞株中Hsp90信号通路的相关蛋白均发生了相同趋势的变化:Akt和Her-2发生明显下调,其辅助蛋白Hsp70表达量增多,同时随着17-AAG浓度的增加Bcl-2表达下降,Bax表达上升,说明17-AAG可启动A549和H446细胞的凋亡模式.结论 17-AAG可通过Hsp90信号通路影响A549和H446细胞中Bax和Bcl-2等凋亡蛋白的表达,最终抑制细胞增殖并诱导细胞凋亡.

关键词：肺肿瘤、细胞系,肿瘤、细胞凋亡、细胞增殖

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在线出版日期：2015-04-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：267-272