大鼠不同级别肺动脉平滑肌细胞对血小板源性生长因子的反应性及其意义

摘要：

目的 分离培养并鉴定大鼠不同分支级别肺动脉平滑肌细胞(PASMC),观察其对血小板源性生长因子(PDGF)反应性的差异,探讨相同刺激因素下,不同级别肺血管病理改变不同的细胞学机制.方法 分离SD大鼠肺动脉并按解剖学分支分为3组:大动脉组,包括肺动脉干及肺内一级主干;中动脉组,指肺内主干二、三级分支;小动脉组,包括肺内动脉四级及以上分支.分离培养不同分支PASMC并用平滑肌细胞抗体进行免疫荧光染色鉴定.给予PDGF刺激,四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测细胞活性;Western blot方法测定增殖细胞核抗原表达水平变化以反映细胞增殖能力;伤口愈合实验检测细胞迁移能力的变化.结果 不同分支PASMC在光学显微镜下观察无明显差别;免疫荧光染色结果显示,三种常用的平滑肌细胞标志物即平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、钙结合蛋白(S100A4)和平滑肌调宁蛋白(calponin)抗体染色均呈阳性,各组间荧光强度无明显差异.正常培养条件下3组细胞增殖率分别为(137.0±12.1)％、(166.1±23.6)％、(156.8±2.5)％,Western blot检测PCNA表达灰度值分别为(0.41±0.10)、(0.55±0.18)和(0.48±0.28),迁移到空白区域的细胞个数分别为(49±14)、(68±13)和(71±7),组间比较差异无统计学意义(P＞0.05).给予10 μg/LPDGF干预48 h后,中、小动脉组PASMC的增殖率分别为(215.7±17.8)％、(195.2±6.6)％,均高于大动脉组[(167.0±14.4)％,均P＜0.01],干预后3组细胞内PCNA蛋白表达灰度值分别为(0.93±0.11)、(1.21 ±0.14)和(0.62±0.03),迁移到空白区域的细胞个数分别为(194 ±46)、(171 ±16)和(68±21),中、小肺动脉组与大动脉组相比差异均有统计学意义(均P＜0.01).结论 尽管不同分支PASMC通常无明显差异,但其增殖与迁移能力的改变在PDGF刺激下根据血管级别而有所不同.提示在相同病理条件下,不同级别肺动脉的病理改变可能与平滑肌细胞本身的反应性不同有关.

关键词：肺动脉平滑肌细胞、血小板源性生长因子、增殖、迁移

所属期刊栏目：37

分类号：R737.9;R562.250.5;R392-33

资助基金：国家自然科学基金;国家自然科学基金;国家自然科学基金

在线出版日期：2014-06-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：347-351