10.3760/cma.j.issn.1001-0939.2014.05.004
RNA恒温扩增实时检测技术对结核分枝杆菌利福平耐药性的研究
目的 建立RNA恒温扩增实时检测技术(SAT)检测MTB利福平耐药性的方法,初步评价其检测效果.方法 以pre-16S rRNA为检测靶标设计RNA探针及带有T7启动子的逆转录扩增引物,42℃恒温扩增实时检测在药物作用下MTB中pre-16S rRNA的变化.通过SAT检测20株已知药物敏感结果的临床分离株在利福平分别作用1、2和3d后pre-16S rRNA的变化,确定SAT检测利福平耐药性的最佳药物作用时间.抽取50株已知药物敏感结果的临床分离株,加药培养至最佳药物作用时间,经SAT检测后,建立受试者工作特征曲线,确定利福平耐药性的判断界值(cut off),并对128株临床分离株进行SAT检测,以Bactec MGIT 960为金标准,评价SAT检测MTB利福平耐药性方法的效果.结果 SAT检测利福平耐药性的最佳药物作用时间为2d,cut off值为2.95;以BactecMGIT 960为判定标准时,该方法检测51株利福平耐药菌株的敏感度为100%(51/51),检测77株利福平敏感菌株的特异度为97.4%(75/77),阳性预测值及阴性预测值均分别为96.2% (51/53)和100%(75/75),符合率为98.4%(126/128),约登指数为0.974.结论 SAT检测利福平耐药性是一种新型耐药性检测方法,具有较高的敏感度和特异度.
分枝杆菌、结核、利福平、核酸扩增技术
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R378.911;S852.618;R52
国家科技重大专项;上海市科委科研计划
2014-06-27(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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