C57BL/6小鼠结节病样肉芽肿模型的建立及鉴定
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10.3760/cma.j.issn.1001-0939.2013.08.007

C57BL/6小鼠结节病样肉芽肿模型的建立及鉴定

引用
目的 建立并鉴定分枝杆菌过氧化物歧化酶多肽(SodA)诱导的C57BL/6小鼠结节病样肉芽肿模型.方法 将30只雌性C57BL/6小鼠按数字随机表法分为5组:复合组(SodA+琼脂糖)、SodA组,不完全弗氏佐剂(IFA)组、琼脂糖组及空白对照组,每组6只.第1天,复合组、SodA组给予50 μg SodA与0.25 ml IFA,混合后背部皮下注射;IFA组、琼脂糖组分别给予IFA 0.25 ml及PBS0.25 ml背部皮下注射;空白对照组未予任何处理.第14天,复合组给予50 μg SodA与6000粒琼脂糖4B珠(溶于0.5ml PBS)共价偶联后尾静脉注射;SodA组给予50 μg SodA(溶于PBS 0.5 ml)尾静脉注射;IFA组、琼脂糖组给予6000粒琼脂糖4B珠(溶于0.5 ml PBS)尾静脉注射;空白对照组未予任何处理.第22天,解剖小鼠,观察淋巴结、肺部大体标本及组织学改变;免疫组织化学检测肉芽肿内巨噬细胞和CD4+ T细胞;检测BALF中细胞分类;流式细胞术检测BALF中CD4+/CD8+及肺组织内干扰素-γ与IL-12水平.结果 复合组肺部与淋巴结均可见结节病样肉芽肿,SodA组淋巴结可见结节病样肉芽肿,但肺部未见肉芽肿,IFA组、琼脂糖组及空白对照组淋巴结及肺部均未见结节病样肉芽肿;肉芽肿中心巨噬细胞特异性抗原Mac-2表达阳性,周围CD4+ T细胞表达阳性;复合组、SodA组BALF中淋巴细胞百分比(分别为19.4%±6.5%、22.3%±8.5%)与IFA组、琼脂糖组及空白对照组(分别为8.5%±4.3%、7.7%±3.4%、0.8%±0.6%)相比均明显增高(均P <0.05);复合组、SodA 组BALF中CD;/CD8+(分别为3.5±1.4、3.2±1.1)与IFA组、琼脂糖组(分别为1.2±0.5、1.0±0.4)相比均明显增高(均P< 0.05);复合组、SodA组肺组织内干扰素-γ、IL-12水平”干扰素-γ:(32.9 ±9.7)ng/L、(26.4 ±7.2)ng/L;IL-12:(29.6±9.4)ng/L、(26.1 ±8.9) ng/L”与IFA组、琼脂糖组及空白对照组”干扰素-γ:(16.5 ±6.8)ng/L、(12.2±5.0) ng/L和(9.0±2.6) ng/L;IL-12:(16.7±4.6) ng/L、(13.6±4.4) ng/L和9.6 ±5.3 ng/L”相比均明显增高(均P<0.05);复合组、SodA组之间以上指标无明显差异,IFA组、琼脂糖组及空白对照组之间以上指标无明显差别(均P>0.05).结论 SodA可以诱导建立C57BL/6小鼠结节病样肉芽肿模型,免疫学特点与人类结节病相似.

结节病、肉芽肿,浆细胞,肺、模型,动物

36

中国博士后科学基金面上基金2012M521888

2013-10-18(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)

共5页

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