木材烟雾凝聚物对人气道平滑肌细胞的弱增殖和强坏死效应

摘要：

目的 观察木材烟雾凝集物(WSC)对人气道平滑肌细胞(HASMC)增殖与坏死的影响.方法 原代培养的HASMC取2至8代细胞,分为对照组、WSC组和烟草烟雾凝集物(CSC)组,每组4个复孔.用细胞毒性检测试剂盒检测细胞活性,用核酸类似物标记检测细胞增殖试剂盒和流式细胞术检测增殖期(S期)细胞比例并分析细胞周期,以荧光定量PCR和Western blot法定量检测细胞周期蛋白D1(cyclin D1)的表达.用膜联蛋白-V/碘化丙啶双荧光染色法鉴别细胞坏死和凋亡.多组间比较采用单因素方差分析,两两比较采用LSD-t检验.结果 细胞活性峰浓度时,WSC组和CSC组的细胞活性[(126±12)％和(142±11)％]均显著高于对照组[(100±0)％],细胞活性抑制浓度时(WSC 10 mg/L、CSC 60 mg/L),WSC组和CSC组的细胞活性(86％和76％)均显著低于对照组[(100±0)％],差异均有统计学意义(q值为3.63～9.33,均P＜0.05).WSC 1 mg/L组细胞增殖比例和cyclin D1蛋白表达量[(124±20)％和1.31±0.64]显著高于对照组[(100±0)％和1.0±0.0],差异均有统计学意义(q值分别为5.85和5.91,均P＜0.05),S+G2/M期细胞比例和cyclin D1的mRNA表达量[(103±4)％和1.18±0.21]与对照组[(100±0)％和1.0±0.0]比较,差异均无统计学意义(q值分别为1.16和2.05,均P＞0.05)；CSC 10 mg/L组细胞增殖比例、cyclin D1蛋白表达量、S+G2/M期细胞比例和cyclin D1的mRNA表达量分别为(204±45)％、1.80±0.25、(140±6)％和1.48 ±0.2,均显著高于WSC 1 mg/L组和对照组[(100±0)％、1.0±0.0、(100±0)％和1.0±0.0],WSC 10 mg/L组坏死细胞比例[(13.39±0.15)％]均显著高于对照组[(1.57±0.41)％]和CSC60 mg/L组[(6.61±1.91)％],CSC 40 mg/L组凋亡细胞比例[(61.8±10.6)％]均显著高于对照组[(0.0±0.0)％]和WSC 10 mg/L组[(1.7±0.4)％],差异均有统计学意义(q值为3.33～18.03,均P ＜0.05).结论 WSC对HASMC的效应与CSC不同,表现为一定剂量下的弱促增殖效应,高剂量暴露时则表现出强有力的细胞坏死效应,但凋亡效应不明显.

关键词：烟雾、肌细胞、平滑肌、细胞增殖

所属期刊栏目：36

分类号：Q291;R73;S816.7

资助基金：国家自然科学基金;国家科技支撑计划;高等学校博士学科点专项科研基金;广东省自然科学基金

在线出版日期：2013-10-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：581-586