莫西沙星对大鼠气道平滑肌细胞线粒体膜电位及凋亡的影响

摘要：

目的 观察大鼠气道平滑肌细胞(ASMC)在不同浓度的莫西沙星作用下，其线粒体膜电位（△Ψm）和半胱氨酸天冬氨酰蛋白酶-3（Caspase-3）表达及细胞凋亡的变化，探讨莫西沙星促进ASMC凋亡的可能机制。方法体外原代培养大鼠ASMC，按随机数字表法分为空白对照组、莫西沙星40 mg/L组（M40组）、80 mg/L组（M80组）、120 mg/L组（M120组）和200 mg/L组（M200组），均孵育48 h后，Annexin-V/PI双标记流式细胞仪分析法检测细胞凋亡率，用JC-1荧光探针在免疫荧光显微镜下检测细胞△Ψm的变化，Western blot法检测凋亡蛋白Caspase-3的表达。结果各莫西沙星浓度组（M40组、M80组、M120组及M200组）的细胞凋亡率分别为(2.95±0.21)％、(7.39±0.63)％、(13.39±0.40)％和(21.20±1.42)％，均明显高于空白对照组的(0.94±0.05)％(均P＜0.01)，并存在浓度依赖性(r=0.974,P＜0.01)；荧光显微镜检测显示空白对照组以红色荧光为主，随着莫西沙星浓度增大，红色/绿色荧光强度值比率(分别为6.54±0.15、4.48±0.14、2.25±0.10和1.99±0.12)逐渐降低，与空白对照组(10.02±0.20)相比差异有统计学意义（均P＜0.01），并存在药物浓度依赖性（r=-0.946,P＜0.01）；Western blot检测显示，空白对照组几乎无Caspase-3蛋白表达(0.31±0.03)，各莫西沙星浓度组Caspase-3蛋白表达(分别为0.45±0.05、0.59±0.04、0.69±0.06和0.84±0.04)均明显高于空白对照组(0.31±0.03)（均P＜0.01），同时也存在浓度依赖性(r=0.979,P＜0.01)。各组细胞凋亡率与△Ψm水平呈负相关（r=-0.887,P＜0.01），与凋亡蛋白Caspase-3水平呈正相关(r=0.955，P＜0.01)，各组细胞△Ψm水平与Caspase-3水平呈负相关(r=-0.951，P＜0.01)。结论 莫西沙星可能通过影响大鼠AΨm促进ASMC凋亡。

关键词：肌细胞、平滑肌、细胞凋亡、膜电位、线粒体、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3、莫西沙星

所属期刊栏目：34

分类号：R56;R44

在线出版日期：2011-11-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：684-687