过氧化还原蛋白6对细菌脂多糖诱导的小鼠急性肺损伤氧化应激的保护作用

摘要：

目的探讨过氧化还原蛋白Peroxiredoxin(Prdx)6对细菌脂多糖(LPS)诱导的小鼠急性肺损伤氧化应激的作用及机制。方法应用PCR法对Prdx6基因敲除小鼠行基因型鉴定并应用免疫组织化学法测定Prdx6蛋白在肺脏的表达。将雄性Prdx6基因敲除型小鼠（18只）按随机数字表法分入Prdx6敲除型对照组（9只）、Prdx6敲除型LPS 24 h组（9只）；将雄性野生型C57BL/6J小鼠（18只）按随机数字表法分入野生型对照组（9只）、野生型LPS 24 h组（9只）。各LPS组小鼠气管滴注LPS(5 mg/kg)制备急性肺损伤模型，于给药后24 h分别行肺脏病理检测,BCA法测定BALF内蛋白浓度，比色法测定肺脏总超氧化物歧化酶(T-SOD)活力和过氧化氢、羰基化蛋白和总抗氧化能力(TAOC),TBA法测定丙二醛的表达。结果Prdx6基因敲除小鼠肺组织免疫组织化学法未检测到Prdx6蛋白表达。两种属小鼠LPS组肺脏病理可见炎症细胞浸润、肺泡间隔增厚及肺泡内出血，Prdx6敲除型较野生型小鼠病理损伤更重。LPS刺激后，野生型LPS 24 h组BALF内的蛋白浓度为(441±54) mg/L，高于野生型对照组的(168±20) mg/L(t=-4.71,P＜0.01)；Prdx6敲除型LPS 24 h组为(770±66)mg/L，高于野生型LPS 24 h组（t=-3.69，P＜0.01）。野生型LPS 24 h组T-SOD为(16.0±1.2) U/mg，低于野生型对照组的(26.5±3.9) U/mg(t=-6.22,P＜0.01)；Prdx6敲除型LPS24 h组为(14.5±5.3)U/mg,与野生型LPS 24 h组差异无统计学意义（t=-0.56,P=0.60）。野生型LPS 24 h组肺脏过氧化氢和丙二醛[分别为(52.3±7.8)nmol/g和(3.3±0.5)nmol/mg]高于野生型对照组[分别为(29.5±3.2)nmok/g和(1.6±0.8)nmol/mg]，差异有统计学意义（t值分别为-4.25和-5.94，均P＜0.01）,Prdx6敲除型LPS 24 h组[分别为(73.5±12.4)nmol/g和(5.9±0.9)nmol/mg],均高于野生型LPS24 h组（t值分别为-3.01和-6.01，均P＜0.05）。野生型LPS24 h组肺脏蛋白羰基为(6.9±1.2)nmol/mg,与野生型对照组的(6.1±0.9)nmol/mg差异无统计学意义(t=-1.62，P=0.15)；Prdx6敲除型LPS 24 h组为(8.9±0.9)nmol/mg，高于野生型LPS 24 h组(t=-2.76,P＜0.05)。野生型LPS 24 h组肺脏TAOC为(4.7±0.6) U/mg,低于野生型对照组的(6.5±0.4) U/mg(t =3.35，P＜0.01)；Prdx6敲除型LPS 24 h组为(3.9 ±0.4) U/mg，低于野生型LPS24 h组(t =2.44，P=0.04)。Prdx6敲除型对照组与其野生型对照组以上参数表达差异无统计学意义。结论在LPS诱导的肺损伤中,Prdx6基因缺失增加了活性氧的产生，加重了氧化应激反应，从而使肺损伤恶化。

关键词：呼吸窘迫综合征、成人、脂多糖类、应激、氧化性

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分类号：R714.253(妇产科学)

资助基金：上海市重点学科基金B0115;教育部博士点新教师基金20100071120066;上海市卫生局科研基金2010072;复旦大学中山医院青年基金

在线出版日期：2011-11-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：679-683