10.3760/cma.j.issn.1001-0939.2011.09.013
去甲肾上腺素对原代培养的人肺动脉阻力血管平滑肌细胞蛋白表达谱的影响
目的用蛋白质组学方法分析去甲肾上腺素(NE)刺激人肺动脉阻力血管平滑肌细胞(PASMC)增殖前后细胞蛋白表达谱的变化。方法通过组织贴块法建立人PASMC细胞株;细胞经同步化后,用10-5 mol/L NE处理细胞24h,对照组未作处理,采用双向凝胶电泳、质谱和生物信息学蛋白质组方法比较NE处理前后细胞蛋白表达谱的变化,并用质谱分析差异在5倍以上的蛋白质分子;进一步使用实时RT-PCR和Western blot法验证差异蛋白的表达变化。结果 原代培养的人PASMC细胞纯度>99%;PASMC经NE刺激后,多种细胞蛋白表达发生改变,其功能涉及细胞骨架相关蛋白、代谢及信号转导等多方面;实时RT-PCR和Western blot结果显示,NE刺激后在细胞内转录和翻译水平,α-烯醇化酶基因表达上调,与二维电泳结果一致。结论NE刺激人PASMC后,可引起细胞内多种不同功能的蛋白表达发生改变,并部分通过α-烯醇化酶基因调控细胞生物学功能。
去甲肾上腺素、肌细胞、平滑肌、蛋白质组、磷酸丙酮酸水合酶
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R714.253(妇产科学)
国家自然科学基金30871139
2011-11-24(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
673-678