反义内皮素转换酶核酸纳米粒对变应性气道炎症的作用

摘要：

目的 观察气管给予12-烷基化壳聚糖纳米粒(12-ACSs)包裹的反义内皮素转换酶(ECE)核酸表达质粒对小鼠变应性气道炎症的影响.方法 将40只健康雌性Balb/c小鼠按完全随机设计原则分为4组,每组10只,分为健康对照(N)组、OVA致敏激发并给予包裹反义ECE核酸的12-ACSs(NM)组、OVA致敏激发气道炎症模型(As)组及OVA致敏激发并给予裸反义ECE核酸(DNA)组.NM组、As组、DNA组在致敏后于首次激发前24 h分别通过气管灌注包裹反义ECE核酸的12-ACSs 100μl生理盐水100μl和反义ECE核酸5μg加生理盐水(总量100μl),N组用等体积生理盐水处理.末次激发后24 h收集BALF,计算BALF中细胞总数、分类计数.HE染色观察各组小鼠肺组织的病理变化.ELISA法检测肺组织匀浆、脾细胞培养卜清液白细胞介素(IL)-4、5、10、13、干扰素-γ(IFN-γ)和内皮素-1(ET-1)水平.流式细胞仪分别检测分泌IL-4、IFN-γ和IL-10脾细胞比例.对各组数据进行正态检验和单因素方差齐性检验,采用LSD法进行两两比较.结果 NM组小鼠BALF中细胞总数为(5.4±0.6)×105/ml、嗜酸性粒细胞为(1.8±0.4)×105/ml,均明显低于As组[分别为(8.5±0.9)×105/ml、(3.8±0.6)×105/ml]和DNA组[分别为(8.3±1.1)×105/ml、(3.8±0.5)×105/m1],均P<0.01;NM组小鼠肺组织的病理损害明显轻于As组和DNA组.肺匀浆N组ET-1水平为(11.7±1.7)ng/L,明显低于NM组的(18.5±1.4)ng/L、As组的(28.9±2.3)ng/L和DNA组的(27.1±1.6)ng/L,均P<0.01,而NM组ET-1水平则明显低于As组和DNA组(均P<0.01),As组和DNA组差异无统计学意义.N组IL-5水平均明显低于NM组、As组和DNA组(均P<0.01),而NM组IL-5水平则明显低于As组和DNA组(均P<0.05),Ag组和DNA组差异无统计学意义.IL-4、IL-13结果与IL-5、ET-1相似.各组IFN-γ的水平差异无统计学意义.NM组IL-10水平高于As组和DNA组(均P<0.01),与N组比较差异无统计学意义,脾细胞培养上清液细胞因子检测结果与肺匀浆结果相似.4组中CD4、IL-4表达均为阳性的细胞表达率分别为N组3.1%、NM组3.3%、As组5.9%、DNA组6.6%;表达IFN-γ、CD4阳性的细胞表达率分别为N组1.2%、NM组1.6%、As组1.7%、DNA组1.6%;表达IL-10、CD4、CD25阳性的细胞分别为N组1.9%、NM组4.3%、As组3.4%、DNA组3.1%.结论 气管内给予包裹反义ECE核酸表达质粒的12-ACSs纳米粒,可减少ET-1、IL-4、IL-5、IL-13的合成,增加IL-10的分泌,减轻变应性气道炎症.

关键词：哮喘、壳聚糖、纳米粒子、基因疗法

所属期刊栏目：31

分类号：R5(内科学)

资助基金：国家自然科学基金重点课题基金30230180

在线出版日期：2009-01-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：820-825