应用基因阵列法快速检测结核分枝杆菌rpoB基因突变

摘要：

目的研制一种新型的基因阵列,用于结核分枝杆菌耐利福平分离株rpoB基因突变的快速检测.方法根据结核分枝杆菌rpoB基因序列设计寡核苷酸探针并制作基因阵列,用生物素标记的引物扩增结核分枝杆菌rpoB基因突变热点的目的片断,与基因阵列杂交,同时以聚合酶链反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)技术及DNA测序法为对照.结果 111株结核分枝杆菌临床分离株经PCR-SSCP分析,41株RFP敏感株SSCP图谱与结核分枝杆菌标准株相同;70株耐RFP菌株中,63株(90%)SSCP图谱与结核分枝杆菌标准株不同,其余7株SSCP图谱与结核分枝杆菌标准株相同.基因阵列检测结果41株RFP敏感株杂交图谱与标准株完全相同,70株耐RFP临床分离株中,63株检测到rpoB基因突变,检出率为90%;其中37株(53%)531位丝氨酸(Ser)置换,15株(21%)526位组氨酸(His)置换,11株(16%)其他位置的氨基酸置换.基因阵列检测结果与PCR-SSCP及测序结果一致.结论用基因阵列法可简便、快速、准确地检测出大多数结核分枝杆菌耐利福平分离株的rpoB基因突变.

关键词：分枝杆菌、结核、利福平、基因、rpoB、药物耐受性、DNA探针

所属期刊栏目：27

分类号：R3(基础医学)

资助基金：军队杰出人才基金01J020

在线出版日期：2004-06-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：332-335