10.3760/j:issn:1001-0939.2004.05.014
应用基因阵列法快速检测结核分枝杆菌rpoB基因突变
目的研制一种新型的基因阵列,用于结核分枝杆菌耐利福平分离株rpoB基因突变的快速检测.方法根据结核分枝杆菌rpoB基因序列设计寡核苷酸探针并制作基因阵列,用生物素标记的引物扩增结核分枝杆菌rpoB基因突变热点的目的片断,与基因阵列杂交,同时以聚合酶链反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)技术及DNA测序法为对照.结果 111株结核分枝杆菌临床分离株经PCR-SSCP分析,41株RFP敏感株SSCP图谱与结核分枝杆菌标准株相同;70株耐RFP菌株中,63株(90%)SSCP图谱与结核分枝杆菌标准株不同,其余7株SSCP图谱与结核分枝杆菌标准株相同.基因阵列检测结果41株RFP敏感株杂交图谱与标准株完全相同,70株耐RFP临床分离株中,63株检测到rpoB基因突变,检出率为90%;其中37株(53%)531位丝氨酸(Ser)置换,15株(21%)526位组氨酸(His)置换,11株(16%)其他位置的氨基酸置换.基因阵列检测结果与PCR-SSCP及测序结果一致.结论用基因阵列法可简便、快速、准确地检测出大多数结核分枝杆菌耐利福平分离株的rpoB基因突变.
分枝杆菌、结核、利福平、基因、rpoB、药物耐受性、DNA探针
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R3(基础医学)
军队杰出人才基金01J020
2004-06-18(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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