蛋白激酶C在支气管哮喘模型大鼠气道平滑肌细胞增殖中的信号转导机制研究

摘要：

目的探讨蛋白激酶C(PKC)信号转导途径在支气管哮喘(简称哮喘)大鼠气道平滑肌细胞(ASMC)增殖中的作用.方法 (1)48只Wistar大鼠分为哮喘组(A组)及对照组(B组),根据激发时间(2、4、8周)又分别分为A1、A2、A3组和B1、B2、B3组,其中A、B组大鼠各12只,A2、A3、B2及B3组各6只.用流式细胞术、四甲基偶氮唑盐(MTT)法、增殖细胞核抗原(PCNA)染色等方法观察每组ASMC增殖;(2)用PKC激活剂12-肉蔻酰-13-乙酸佛波酯(PMA)及抑制剂Ro-31-8220分别干预A1、B1组ASMC,观察ASMC增殖的变化;(3)用逆转录-聚合酶链测定(RT-PCR)和免疫细胞化学法检测A1、A2、A3组和B1组ASMC PKC-α的表达.结果 (1)A组ASMC S期比例、吸光度(A)值、PCNA表达增高,与B组比较差异有显著性(P＜0.01).(2) A1组ASMC S期比例、A值、PCNA阳性表达率在干预前分别为(19±3)%、0.459±0.036、(80±10)%;10 nmol/L PMA处理后分别为(27±4)%、0.599±0.078、(95±9)%;50 nmol/L PMA处理后为(14±3)%、0.346±0.038、(53±8)%;Ro-31-8220处理后为(14±3)%、0.343±0.048、(49±8)%.各干预剂处理后与处理前比较差异均有显著性(P＜0.01);50 nmol/L PMA处理后,与10 nmol/L PMA处理后比较差异也有显著性(P＜0.01);与Ro-31-8220处理后比较差异无显著性(P＞0.05).(3) A1、A2、A3组ASMC PKC-α的mRNA A值分别为1.08±0.06、1.12±0.05、1.10±0.08,与B1组(0.84±0.07)比较,差异有显著性(P＜0.01);A1、A2、A3组ASMC PKC-α蛋白阳性表达率分别为(54±5)%、(56±5)%、(53±6)%,与B1组[(28±4)%]比较,差异有显著性(P＜0.01).结论哮喘ASMC增殖活性增加,PKC及其亚型PKC-α参与其增殖,提示PKC在哮喘ASMC增殖的信号转导中具有重要作用.

关键词：哮喘、气道平滑肌细胞、增殖、蛋白激酶C、信号传递

所属期刊栏目：26

分类号：R56(呼吸系及胸部疾病)

资助基金：教育部高校骨干教师资助计划

在线出版日期：2004-02-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：756-760