槐耳清膏诱导人肺腺癌细胞A549凋亡的实验研究

摘要：

@@ 槐耳清膏是药用真菌槐耳菌质的热水提取物，临床上证实有一定的抗癌效果。为进一步探讨其抗癌机制，我们研究了槐耳清膏在体外诱导人肺腺癌细胞系A549凋亡的作用。
材料与方法引进并培养人肺腺癌细胞系A549细胞株。制备不同浓度的槐耳清膏PRMI-1640含药培养液与接种成功、呈对数生长的A549细胞共同培养24 h后，每6 h进行以下观察及测定（设阳性对照组羟基喜树碱100 μg/ml，共同孵育10～12 h后进行测定）［1］。（1）荧光染色：收集培养细胞，清洗并均匀涂片自然风干24 h，置于0.05 mg/L的Hoechst33258及0.1 mg/L的硫柳汞的无钙、镁的磷酸缓冲染色液中作用40 min，封片后荧光显微镜下观察、拍照、计数；（2）电子显微镜观察：同上收集细胞6×106，磷酸缓冲液（PBS）清洗，戊二醛固定，再经锇酸染色、缩水包埋、切片后透射电子显微镜观察照相记录；（3）流式细胞仪分析：同法收集、清洗、固定细胞2×106，离心后加入100 μl磷酸二氢钠/柠檬酸缓冲液室温震荡30 min，在离心的细胞中加入含100 mg/L 核糖核酸酶A（Rnase A）和25 mg/L 碘化丙啶（PI）的染色液1 ml在暗处4℃染色3 h，用FACSort流式细胞仪分析细胞周期。实验数据通过SPSS For Windows软件进行统计学分析。

机标关键词：槐耳清膏、人肺腺癌细胞系、凋亡、流式细胞仪分析、显微镜观察、染色液、柠檬酸缓冲液、培养、收集、清洗、统计学分析、羟基喜树碱、磷酸缓冲液、磷酸二氢钠、核糖核酸酶、照相记录、荧光显微、荧光染色、药用真菌、细胞周期

所属期刊栏目：24

分类号：R28(中药学)

资助基金：湖北省武汉市卫生局科研项目2000-148

在线出版日期：2004-01-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共2页

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