肺炎支原体IgM和IgG抗体的时间分辨荧光免疫层析法的建立及初步应用

摘要：

目的:构建可快速、灵敏、定量检测肺炎支原体(MP)免疫球蛋白(Ig)M和IgG抗体的时间分辨荧光免疫层析法(TFICA)。方法:基于毛细管作用，应用铕微球示踪，通过对抗原/抗体微球偶联比、微球稀释度、划膜浓度和血清稀释度进行优化，建立检测MP-IgM和IgG抗体的TFICA，并考核其方法学性能(如灵敏度、特异性、稳定性)。通过对55名健康体格检查者进行检测获得TFICA的正常参考值；采用TFICA与市售化学发光法试剂盒分别检测88名受试者(33例患者，55名健康体格检查者)的血清样本，计算结果一致性(
Kappa检验)。
结果:反应条件为：鼠抗人IgG抗体和MP抗原与微球分别按质量比1∶20和1∶100反应，微球工作稀释度分别为1∶200和1∶100；MP抗原和羊抗人IgM的划膜浓度分别为0.5和1.0 g/L；血清稀释度均为1∶300。建立的MP-IgM和IgG TFICA测量范围分别为(0.78~70.00)×10
3相对单位(RU)/L和(0.17~200.00)×10
3 RU/L，检测灵敏度分别为0.78×10
3和0.17×10
3 RU/L，与甲状腺过氧化物酶抗体、心磷脂酶抗体、甲状腺球蛋白抗体均无交叉反应；相对标准偏差分别为3.7%~14.8%和2.9%~14.0%。经37 ℃ 5 d快速老化，MP-IgM和IgG TFICA试剂的平均信号降低率分别为13.7%和14.2%，提示热稳定性好。该法正常参考值分别为3.33×10
3和2.61×10
3 RU/L；与市售化学发光试剂盒检测结果的
Kappa值分别为0.79和0.76。
结论:TFICA检测MP-IgM和IgG抗体具有操作简捷、灵敏度高、特异性好、可定量的优点，具备一定的临床应用价值。

关键词：免疫球蛋白M、免疫球蛋白G、肺炎支原体、荧光免疫测定、微球体

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在线出版日期：2023-05-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：226-230