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摘要: 目的 制备131I标记的抗神经纤毛蛋白(NPR)-2单克隆抗体(mAb)(131I-anti-NRP-2-mAb),在体内外观察其与NRP-2表达阳性肿瘤的结合特性,以探讨其应用于NRP-2表达阳性肿瘤显像的可能性.方法 (1)采用氯胺T法制备131 I-anti-NRP-2-mAb,经Sephadex G25柱纯化,用薄层色谱法测定放化纯和稳定性.(2)利用A549细胞进行体外实验,测定131I-anti-NRP-2-mAb的结合率和受体的亲和力.(3)将A549荷瘤裸鼠以随机抽样法随机分为4组,每组4只,分别于尾静脉注射0.37 MBq131 I-anti-NRP-2-mAb,6、24、48和72h后,测定并计算主要器官及组织的放射性摄取值[每克组织百分注射剂量率(%ID/g)]、肿瘤/肌肉放射性(T/M)比值和肿瘤/血液放射性(T/B)比值.(4)将A549荷瘤裸鼠以随机抽样法分为未阻断组和竞争性阻断组,每组3只,未阻断组经尾静脉注射3.7 MBq 131I-anti-NRP-2-mAb,竞争性阻断组经尾静脉注射同等剂量的标记物和100μg未标记的抗NRP-2 mAb,均分别于注射后6、24、48和72 h行γ显像,观察肿瘤放射性浓聚状况.采用两样本t检验分析数据.结果 (1)131 I-anti-NRP-2-mAb标记率为(94.69±3.63)%,放化纯为(98.56±0.48)%;室温下磷酸盐缓冲液中放置72 h,其标记率仍>85%.(2) 131I-anti-NRP-2-mAb与A549细胞特异性结合率,在60、120、180和240 min时分别为(3.95±0.18)%、(5.19±0.65)%、(6.60±0.36)%和(5.58±0.63)%;加入过量未标记的anti-NRP-2-mAb后,下降至(0.94±0.31)%、(1.12±0.17)%、(1.24±0.25)%和(1.04±0.18)%,阻断组与未阻断组4个时间点细胞结合率间的差异具有统计学意义(t值:11.22、9.89、19.66和9.95,均P<0.05);与A549细胞表面受体结合的半抑制浓度(IC50)值为(410.8±1.2) nmol/L.(3)注射131I-anti-NRP-2-mAb后,T/B比值和T/M比值均随着时间的延长逐渐增高,在72 h达到最高,分别为1.10±0.20和3.83±0.18.(4)γ显像示:未阻断组荷瘤鼠注射131I-anti-NRP-2-mAb后6h即可见肿瘤显影,48 h后肿瘤显像最清晰;竞争性阻断组荷瘤鼠在各时间点肿瘤均未见明显显影.结论 成功制备131I-anti-NRP-2-mAb,该标记物对NRP-2具有良好的靶向性.
关键词: 神经纤毛蛋白质2、抗体、单克隆、同位素标记、碘放射性同位素、放射性核素显像、肺肿瘤、小鼠、裸
所属期刊栏目: 38
资助基金: 国家自然科学基金81571707;福建省自然科学基金2015J01519;福建省卫生系统中青年骨干人才培养项目2014-ZQN-ZD-35;福建省卫生和计划生育委员会青年科研课题2015-2-46National Natural Science Foundation of China81571707;Natural Science Foundation of Fujian Province2015J01519;Program for Training Young Talents of Fujian Health2014-ZQN-ZD-35;Program for Young Scholars of Fujian Health and Family Planning Commission2015-2-46
在线出版日期: 2018-03-06(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
页数: 共5页
页码: 37-41
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