经钠碘同向转运体监测骨髓间充质干细胞向颅内脑胶质瘤迁移的实验研究

摘要：

目的 通过制备携带NIS及EGFP基因的重组慢病毒并转染骨髓间充质干细胞(BMSCs),探讨NIS基因监测BMSCs向颅内脑胶质瘤迁移的可行性.方法 将NIS及EGFP基因片段分别亚克隆至慢病毒载体pLVX-puro,制备慢病毒pLVX-CMV-NIS-EGFP,同时构建对照组慢病毒pLVX-CMV-0-EGFP.分离培养BMSCs,转染后经嘌呤霉素筛选,得到稳定干细胞株BMSCs-NIS-EGFP及对照组干细胞株BMSCs-EGFP.Western blot分析NIS蛋白在细胞中的表达.通过摄碘实验、NaClO4抑制实验验证NIS蛋白的功能.制备裸鼠颅内脑胶质瘤模型,经尾静脉注入BMSCs-NIS-EGFP,24h后行125I microSPECT显像,观察NIS作为报告基因监测BMSCs-NIS-EGFP向颅内脑胶质瘤迁移的情况.结果 成功构建并制备重组慢病毒pLVX-CMV-NIS-EGFP及pLVX-CMV-0-EGFP,完成BMSCs的分离培养.病毒转染经嘌呤霉素筛选得到稳定于细胞株BMSCs-NIS-EGFP及BMSCs-EGFP.Western blot显示NIS基因在BMSCs-NIS-EGFP中大量表达,而在BMSCs-EGFP中无表达.细胞摄碘实验显示BMSCs-NIS-EGFP细胞具有摄碘功能,30 min摄碘峰值是对照组BMSCs-EGFP细胞的近10倍,且其摄碘可被NaClO4显著抑制.成功制备裸鼠脑胶质瘤模型,microSPECT显像显示颅内脑胶质瘤部位有明显的125I放射性摄取增高.结论 重组慢病毒pLVX-CMV-NIS-EGF可使NIS基因在BMSCs中表达并介导125I的摄取,NIS基因可有效监测BMSCs向颅内脑胶质瘤的迁移,这为开展以BMSCs为载体、由NIS介导的脑胶质瘤基因靶向治疗奠定了基础.

关键词：神经胶质瘤、骨髓、干细胞、钠碘转运体、体层摄影术、发射型计算机、单光子、小鼠、裸

所属期刊栏目：35

分类号：R736.1;R587.1;R817.4

资助基金：国家自然科学基金81471686

在线出版日期：2015-11-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：346-350