131I-K237对人前列腺癌LNCaP细胞的凋亡诱导作用

摘要：

目的 鉴定131I-K237多肽(H-组氨酸-苏氨酸-蛋氨酸-酪氨酸-酪氨酸-组氨酸-组氨酸-酪氨酸-谷氨酰胺-组氨酸-组氨酸-亮氨酸-OH)在体外与人前列腺癌LNCaP细胞的亲和性和对其的凋亡诱导作用.方法 应用Iodogen法对K237多肽进行131I标记,用TLC测定标记率及经SephadexG25层析柱分离纯化后的131I-K237放化纯.于96孔板接种LNCaP细胞,分4组,每组设3个复孔:实验组加入15 kBq 131I-K237;阴性对照组加入Na131I,设5、10、15 kBq 3个亚组;竞争组加入K237(质量浓度分别为1、2、4、8、16 μg/μl)后加入15 kBq 131I-K237;空白对照组加入PBS.48 h后测定放射性计数并计算各组细胞结合率.在24孔板接种LNCaP细胞,分3组:131I-K237干预组分别加入5、10、15 kBq的131I-K237,K237干预组分别加入100μl质量浓度为1、2、4μg/μl的K237,空白对照组加100μl PBS;温育48 h后,分别应用光学显微镜观察细胞形态变化,荧光显微镜鉴别凋亡细胞,再行核酸凝胶电泳,并以流式细胞术(FCM)检测LNCaP细胞的凋亡率.采用单因素方差分析和最小显著差异t检验比较数据差异.结果 131I-K237标记率达(73.7±3.2)％,分离纯化后放化纯为(96.7±0.6)％.实验组、阴性对照3个亚组和空白对照组的LNCaP细胞结合率分别为(95.8±1.5)％、(8.2±0.4)％、(8.3±0.6)％、(8.6±0.5)％和0.竞争组实验结果显示,131I-K237与LNCaP细胞的结合率随未标记多肽K237量的增加而显著下降(t=4.71,P＜0.01).LNCaP细胞经131I-K237干预后,光学显微镜和荧光显微镜下观察到凋亡细胞,DNA电泳可见明显的梯形条带.5、10、15 kBq 131I-K237组LNCaP细胞凋亡率分别为(34.1±2.9)％、(37.3±3.4)％、(41.7±3.6)％;质量浓度为1、2、4 μg/μl的未标记K237组凋亡率分别为(10.8±1.0)％、(12.5±2.1)％、(13.1±2.4)％;空白对照组中自然凋亡率为(2.9±0.3)％,差异有统计学意义(F=76.31,P＜0.05);131 I-K237组各亚组间差异有统计学意义(t=3.09、3.27和4.52,均P＜0.05).结论 131I-K237能与人前列腺癌LNCaP细胞特异性结合,对LNCaP细胞具有显著的凋亡诱导作用.

关键词：前列腺肿瘤、肿瘤细胞、培养的、碘放射性同位素、细胞凋亡

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分类号：R817;R711.31;O657.3

资助基金：宁夏回族自治区自然科学基金NZ2010140

在线出版日期：2015-04-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：480-483