131I-FIAU/TK报告基因系统监测大鼠脑梗死模型中移植细胞的研究

摘要：

目的 检测经不同途径移植骨髓间充质干细胞后大鼠脑梗死模型中ⅢI-氟-碘阿糖呋喃基尿嘧啶(FIAU)的生物分布及脑组织中胸苷激酶(TK)基因的表达,为核素报告基因显像无创性监测细胞移植治疗脑梗死提供实验依据.方法 制备携带TK-内部核糖体连接位点-脑源性神经生长因子(IRES-BDNF)基因的腺病毒重组体Ad5-TK-IRES-BDNF-增强型绿色荧光蛋白(EGFP)；线栓法制作大鼠脑梗死模型；将转基因的干细胞分别通过脑实质、侧脑室、颈动脉和尾静脉注射入大鼠脑梗死模型中,以正常大鼠为对照组；Iodogen固相氧化法标记氟-阿糖呋喃基尿嘧啶(FAU)后进行生物分布研究,计算％ ID/g；采用实时定量PCR和Western blot定量分析TK基因的表达；数据分析采用独立样本t检验、单因素方差分析及Pearson相关分析.结果 原位移植组梗死侧脑组织中的％ID/g为0.124±0.013,明显高于侧脑室移植组(0.052±0.004)、颈动脉移植组(0.061±0.002)、尾静脉移植组(0.059±0.005)和对照组(0.005±0.001),差异有统计学意义(t=2.913 ～5.652,P均＜0.05),其他移植细胞组组间差异无统计学意义(t=0.694 ～1.448,P均＞0.05).所有移植细胞组内两侧脑组织％ID/g的差异有统计学意义(t=9.004～ 15.734,P均＜0.05),而对照组两侧间差异无统计学意义(t=1.511,P=0.182).此外,原位移植组梗死侧脑组织中TK基因的表达高于其他各组,差异有统计学意义(t =7.482～12.371,P均＜0.05)；且脑组织TK基因表达的相对量与％ID/g呈正相关(r =0.971,P＜0.001)；脑组织内TK/β-actin的比值与％ID/g呈正相关(r=0.899,P=0.002).结论 原位注射是治疗脑梗死的最佳细胞移植途径；选择适当示踪剂,可利用PET或SPECT进行无创性活体监测细胞移植治疗脑梗死的效果.

关键词：脑梗塞、基因、报告、阿糖呋喃尿嘧啶、碘放射性同位素、细胞移植、大鼠

所属期刊栏目：31

分类号：R742(神经病学与精神病学)

资助基金：国家自然科学基金30770605

在线出版日期：2012-01-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：301-305