99Tcm标记MDM2反义寡核苷酸的实验研究

摘要：

目的 研究99Tcm标记小鼠双微体扩增基因(MDM2)mRNA的反义寡核苷酸(ASON)显像诊断乳腺癌的价值.方法 以联肼尼克酰胺(HYNIC)为螯合物对ASON、错义寡核苷酸(ASONM)进行99Tcm标记,检测标记率、放化纯及其与互补正义链(SON)的结合能力.阳离子脂质体(lipofectamine 2000)包裹反义探针及错义探针转染人乳腺癌细胞(MCF-7),通过RT-PCR和Western-blotting法观察乳腺癌细胞MDM2 mRNA和蛋白表达.建立荷人乳腺癌MCF-7裸鼠肿瘤模型,分别进行体内分布和肿瘤显像研究.结果 ASON的标记率为(57.2±2.98)%(n=5),ASONM的标记率为(56.3±3.01)%(n=5),经纯化后放化纯可达95%以上,且仍保持与互补链的结合能力.不同浓度反义探针作用于乳腺癌细胞24 h后,各浓度组MDM2 mRNA和蛋白的表达量差异均有统计学意义(P＜0.01),而错义探针对MDM2 mRNA和蛋白的表达没有明显影响.体内分布显示,反义及错义探针主要经肝、肾排泄,注射反义探针后,肿瘤/血液和肿瘤/骨骼肌放射性比值随时间的推移而增加.注射反义探针后1 h肿瘤显影,肿瘤/对侧肢体放射性比值随时间推移而增加,各时间点错义探针在肿瘤内的聚集量均明显少于反义探针,差异有统计学意义(P＜0.01).结论 99Tcm标记的MDM2 ASON可在荷人乳腺癌MCF-7裸鼠肿瘤模型的肿瘤组织中特异性聚集,为乳腺癌的特异性诊断提供了一种可能的新方法.

关键词：寡核苷酸类、反义、基因扩增、乳腺肿瘤、肿瘤细胞、培养的、放射性核素显像、小鼠

所属期刊栏目：27

分类号：R4(临床医学)

在线出版日期：2007-12-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：195-201