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10.3760/cma.j.issn.2095-2848.2002.04.020

放射性碘间接标记血管活性肠肽

引用
目的研究能有效降低体内脱碘的血管活性肠肽(VIP)的标记方法.方法①标记前体N-琥珀酰亚胺-3-(三正丁基锡)苯甲酸酯(ATE),得到中间体N-琥珀酰亚胺-3-I(125I)代苯甲酸酯(S125IB):采用Iodogen方法进行放射性碘标记,并考察一系列条件对标记率的影响.通过Sep-Pak硅胶柱分离得到产物S125IB,于4 ℃避光保存2 d.标记率和稳定性通过薄层层析(TLC)方法测定.②S125IB与VIP的联接:S125IB与VIP直接混合得到产物3-I(125I)代苯甲酰化血管活性肠肽(125IBA-VIP).以反相TLC测定其标记率.产物125IBA-VIP经高效液相层析(HPLC,RP C18柱)分离得到.三氯乙酸(TCA)沉淀法测定125IBA-VIP的体外稳定性.体外生物活性分析通过与细胞株SGC7901的细胞结合实验测定.结果①前体标记结果.室温条件下,氧化剂用量约10 μg,n(ATE)∶n(Na125I)为3~8∶1,反应5 min标记率>96%.S125IB在上述条件下较稳定,TLC结果显示无明显的放射性杂质产生.②S125IB与VIP的联接.TLC测定标记率>75%,HPLC示125IBA-VIP的保留时间(tR)为13.3 min,S125IB为19.6 min,VIP为8.32 min.125IBA-VIP的体外稳定性较好,4 ℃保存7 d后,无明显脱碘现象.细胞结合实验结果表明,125IBA-VIP活性与Iodogen法直接标记得到的125I-VIP一致,无明显生物活性损失.结论以ATE为前体对VIP进行放射性碘标记,解决了直接标记稳定性差、体内脱碘严重的问题,为蛋白质及多肽的放射性卤标提供了一个有效途径.

肽类、碘放射性同位素、同位素标记

22

R81(放射医学)

国际原子能机构IAEA国际合作项目9570/R0

2004-01-08(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)

共4页

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0253-9780

32-1137/R

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