槲皮素通过下调MALAT1抑制膝骨关节炎小鼠软骨损伤及软骨细胞凋亡的相关机制

摘要：

目的 探究槲皮素(quercetin,QUE)通过下调人肺腺癌转移相关转录本1(metastasis-as-sociated lung adenocarcinoma transcript 1,MALAT1)抑制膝骨关节炎(knee osteoarthritis,KO A)小鼠软骨损伤及软骨细胞凋亡的相关机制.方法 将雄性C57BL/6小鼠分为假手术组、OA组、OA+QUE组,每组各10只.采用内侧半月板失稳术(destabilization of medial meniscus,DMM)诱导膝OA模型,术后5周,小鼠膝关节腔内注射100 μL 0.9％(质量分数)氯化钠注射液或QUE(8 μmol/L),每周2次,共8周.术后13周,处死小鼠并采集膝关节,分别进行病理观察、Western blot或反转录定量聚合酶链反应检测.从健康雄性C57BL/6小鼠的膝关节软骨中分离软骨细胞,进行原代培养,分为空白组、白细胞介素-1β(interleukin-1 β,IL-1β)组、QUE组、IL-1 β+QUE组.IL-1β组用小鼠重组IL-1β处理24 h;QUE 组用 2～256 μmol/L QUE 作用 48 h;IL-1β+QUE 组先用 IL-1β 处理 24 h,然后再用 4、8、16 μmol/L QUE作用;空白组不做任何特殊处理.噻唑兰(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)试剂检测细胞活力.结果 与假手术组相比,OA组小鼠OARSI评分(4.50±1.08分vs.0.40±0.52分)、MALAT1 mRNA(1.47±0.06 vs.1.00±0.04)和核因子 κB(nuclear transcription factor-KB,NF-κB)mRNA(1.71±0.08 vs.1.00±0.03)以及白细胞介素 6(interleukin 6,IL-6)、基质金属蛋白酶 13(matrix metalloproteinase 13,MMP-13)、caspase-3 蛋白表达水平显著升高,同时 miR-9 表达(0.78±0.03 vs.1.00±0.03)降低(P＜0.05);相反地,OA+QUE组小鼠OARSI评分改善至2.40±1.26分,同时MALAT1、miR-9、NF-κB、IL-6、MMP-13 和 caspase-3 表达较 OA 组被逆转(P＜0.05).miR-9 存在与MALAT1和NF-κB结合的靶向互补序列,而且QUE可抑制MALAT1启动子的转录活性和相对mRNA表达水平.对于细胞实验,与空白组相比,IL-1β组miR-9表达降低(0.45±0.04vs.1.00±0.03),NF-κB表达(1.52±0.08 vs.0.99±0.02)升高(P＜0.05);而 IL-1β+QUE 组 miR-9 和 NF-κB 表达水平则以剂量依赖性方式较IL-1β组被反转(P＜0.05).结论 通过QUE直接靶向MALAT1/miR-9/NF-κB轴可能是治疗KOA的一种新的治疗策略.

关键词：槲皮素、膝骨关节炎、人肺腺癌转移相关转录本1、软骨细胞、炎性反应

所属期刊栏目：16

分类号：R681(骨科学（运动系疾病、矫形外科学）)

在线出版日期：2023-07-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：33-40