胃癌细胞系SGC7901通过间充质干细胞原纤毛调控钙信号对成骨分化的影响

摘要：

目的 探究胃癌细胞系SGC7901如何影响间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)成骨分化.方法 分离SD大鼠乳鼠股骨,获取原代MSCs.将原代MSCs和经血管紧张素Ⅱ(angiotensin Ⅱ,AngⅡ)处理的原代MSCs分别与胃黏膜细胞系GES-1和胃癌细胞系SGC7901共培养,并以成骨诱导培养基(OS培养基)诱导72 h,提取MSCs总蛋白和总RNA.对总RNA进行RNA-seq检测并对显著差异基因进行京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)和真核直系同源群(euKaryotic Ortholog Groups,KOG)可视化分析;以GAPDH为内参,Western blot检测成骨标志蛋白,钙信号相关蛋白和原纤毛结构相关蛋白表达;对共培养后获取的MSCs总蛋白进行碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性检测.结果 MSCs原代培养细胞呈多角形或梭形;经过成骨诱导培养基(OS培养基)诱导,茜素红染色矿化结节呈红色;以SGC7901为对照,MSCs细胞高表达CD44,低表达CD34.与GES-1共培养相比,SGC7901共培养的MSCs中骨钙蛋白(osteocalcin,OCN)和Runx2表达均降低(P＜0.01),ALP酶活力显著降低(P＜0.001).SGC7901共培养上调了 MSCs中乙酰化α-微管蛋白和γ-微管蛋白表达(P＜0.01).RNA-seq分析显著差异基因共3 712个,2 756个基因表达上调,956个基因表达下调;SGC7901共培养的MSCs中ADRB3和PLN表达均降低(P＜0.001).经过Ang Ⅱ处理后,SGC7901共培养抑制的Runx2和骨桥蛋白(osteopontin,OPN)表达水平增加(P＜0.05),ALP酶活力增强(P＜0.001).结论 胃癌细胞SGC7901通过促进MSCs原纤毛生长,抑制钙信号从而抑制MSCs成骨分化.

关键词：SGC7901、间充质干细胞、成骨分化、原纤毛、钙信号

所属期刊栏目：16

分类号：R681(骨科学（运动系疾病、矫形外科学）)

资助基金：重庆市渝中区科学技术委员会科研项目;重庆市研究生科研创新项目;重庆市科委面上项目;重庆市科委面上项目;教育部人文社会科学研究项目;重庆市教育委员会

在线出版日期：2023-07-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共10页

页码：23-32