Pannexin1通道蛋白对微张力刺激下骨髓间质干细胞成骨分化的影响

摘要：

目的探讨Pannexin1（Px1）通道蛋白对微张力刺激下骨髓间质干细胞（mesenchymal stem cells，MSCs）成骨分化的影响。方法自Sprague Dawley大鼠（3周，雌雄不限，100~120 g）股骨和胫骨中提取全骨髓细胞进行原代培养。使用Px1通道蛋白抑制剂——甘珀酸/生胃酮（carbenoxolone，CBX）的安全剂量100μmol/L（通过CCK8细胞活性检测试剂测得）进行实验。利用全骨髓培养法培养原代大鼠MSCs，细胞传代至3~4代时，获得纯度较好的MSCs。将MSCs随机分为三组：对照组（MSCs既不经CXB处理也不施加微张力刺激）、微张力刺激组（4000μstrain）和微张力刺激+CBX组。微张力刺激时间为15 min，CBX预处理时间分别为3 h、6 h、12 h和24 h。测定碱性磷酸酶活性、Ⅰ型胶原蛋白的表达、细胞内钙离子（Ca2+）的浓度，以及Px1通道蛋白、磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶（p?p38 mitogen?activated protein kinase，p?p38MAPK）和p?ERK的表达活性。结果碱性磷酸酶（alkaline phosphatase，ALP）表达活性在微张力刺激组最高，而使用CBX预处理后表达则不会升高。微张力刺激也可上调Ⅰ型胶原蛋白的表达，增加Ca2+浓度，上调Px1通道蛋白及p?p38MAPK的表达，使用CBX预处理会降低以上效果。但微张力刺激下p?ERK的下调表达不受CBX预处理的影响。结论微张力刺激可促进MSCs成骨分化，但使用CBX预处理会抑制微张力刺激的促进作用；其可能机制是CBX抑制了p?p38MAPK的活性。

关键词：间质干细胞、细胞分化、物理刺激

所属期刊栏目：37

分类号：R85;N

资助基金：国家自然科学基金30973071【Fund program】 National Natural Science Foundation of China 30973071

在线出版日期：2017-03-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：44-51