胶质细胞源性神经营养因子体内转基因治疗对脊髓运动神经元的保护作用

摘要：

目的研究脂质体介导胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)体内转基因对大鼠脊髓损伤(SCI)后脊髓前角运动神经元的保护作用.方法雄性SD大鼠50只随机均分为绿色荧光蛋白(GFP)组和GDNF组.采用改良Nystrom法制备大鼠脊髓急性压迫损伤模型,将脂质体DC-Chol和重组质粒pEGFP-GDNF cDNA混合后注入大鼠损伤脊髓.利用RT-PCR技术和荧光显微镜检测GDNF基因体内转染的表达;应用尼氏染色、酶组织化学染色方法观察SCI后伤区前角运动神经元存活的数目和胆碱酯酶(CHE)及酸性磷酸酶(ACP)的变化;采用斜板试验和BBB评分观察大鼠后肢运动功能恢复情况.结果SCI后1周和4周GDNF在损伤局部有转录和蛋白水平高表达.SCI后第1、2、4周,GDNF组前角运动神经元存活数目(20.4±3.2、21.7±3.6、22.5±3.4)明显多于GFP组(16.8±2.8、17.3±2.7、18.2±3.2)(P＜0.05).SCI后第1、2周,GDNF组前角运动神经元中CHE平均灰度值(74.2±25.8,98.7±31.6)低于GFP组(98.5±32.2,134.6±45.2)(P＜0.01),ACP平均灰度值(84.5±32.6,79.5±28.4)高于GFP组(61.2±24.9,52.6±19.9)(P＜0.01).大鼠SCI后1～4周,GDNF治疗组后肢运动功能评分明显高于GFP对照组,两组间差异有显著性意义(P＜0.05).结论GDNF体内转基因能保护脊髓不完全性损伤后引起的神经元坏死和退变,促进大鼠后肢运动功能的恢复,提示阳离子脂质体介导GDNF体内转基因治疗SCI的方法是可行的.

关键词：神经生长因子、转化生长因子β、脊髓损伤、运动神经元、脂质体、转基因

所属期刊栏目：22

分类号：R6(外科学)

资助基金：国家自然科学基金30000048;国家重点基础研究发展计划973计划1999054005;军队青年基金01Q080

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：551-555