10.3760/cma.j.issn.0253-2352.1999.09.119
成年大鼠破骨细胞体外培养及细胞凋亡的观察
目的:为研究骨重建过程中破骨细胞的关键作用,建立成年大鼠(12~50周龄)破骨细胞的体外培养方法并进行细胞凋亡观察。方法:大鼠处死后,在无菌条件下取出股骨,剪去两骺端,以αMEM将骨髓细胞冲洗出,并离心洗细胞2次,置于αMEM培养液,内含αMEM,体积分数为10%的胎牛血清(FCS)和1α,25-(OH)
2 Vit D
3 10
-8 mol/L,在24孔板内,以体积分数为5%的CO
2,37℃,培养8天。按原位DNA末端标记(TUNEL)检测试剂盒方法染色细胞,以荧光显微镜观察细胞凋亡。
结果:经活体观察、HE染色、抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色,光学显微镜、扫描电镜观察骨片之陷窝的形成,证实培养的细胞为破骨细胞;TUNEL检测,荧光显微镜下可见破骨细胞核染色质浓缩、裂解等凋亡细胞的典型变化与未凋亡的破骨细胞。结论:本实验建立了成年大鼠破骨细胞的体外培养方法并进行细胞凋亡观察。
破骨细胞、细胞,培养的、体外发生、脱噬作用
19
国家自然科学基金资助39770668
2022-10-25(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共4页
565-567,C3