转化生长因子-β1/Smad信号通路在肾小球系膜细胞的表达及血管紧张素转化酶抑制剂对其影响

摘要：

目的 探讨转化生长因子(transforming growth factor,TGF)-β1/Smad信号传导通路在肾小球系膜细胞(glomerular measanial cell,GMC)中的作用,观察血管紧张素转化酶抑制剂(angiotensin-converting enzyme inhibitor,ACEI)福辛普利(fosinopril,Fos)在该通路中对磷酸化Smad2/3(phosphorylation-Smad2/3,P-Smad2/3)和I型胶原蛋白(collagen I,Col I)表达的影响,阐明福辛普利的肾保护作用机制.方法 采用经典方法进行大鼠肾小球系膜细胞复苏、培养和传代后,将其按处理方式分为3组:①TGF-β1组(TGF-β 5 ng/mL处理);②Fos组(TGF-β1 5 ng/mL+Fos 1×10-4mol/L处理);③对照组(空白).甲基噻唑基四唑(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)比色法分别检测3组肾小球系膜细胞增殖光密度(optical density,OD)值,计算细胞抑制率;间接免疫荧光法检测磷酸化Smad2/3表达情况;酶联免疫吸附测定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)法测定I型胶原蛋白的变化,计算抑制率.结果 各时间点肾小球系膜细胞增殖荧光强度比较,TGF-β1组明显高于对照组,Fos组低于TGF-β1组,差异有显著意义(P<0.05).磷酸化Smad2/3在对照组仅极微量表达,TGF-β1组在刺激30 min后,荧光强度显著增强,且集中于细胞核.与TGF-β1组相比,Fos组磷酸化Smad2/3表达下降,细胞荧光强度较弱,差异有显著意义(P<0.05).对照组I型胶原蛋白仅少量基础性分泌.与对照组相比,TGF-β1组在各时间点I型胶原蛋白分泌量显著上升,差异有显著意义(P<0.05);与TGF-β1组比较,Fos组I型胶原蛋白在15 min和6 h的表达量比较,差异无显著意义(P>0.05);在12 h和24 h比较,差异有显著意义(P<0.05).结论 人重组转化生长因子-β1能激活体外培养的大鼠肾小球系膜细胞磷酸化-Smads表达,并激活转化生长因子-β/Smads信号途径,该途径激活能致 I 型胶原分泌增多,并能诱导肾小球系膜细胞增殖,其作用呈一定的时间依赖性关系.福辛普利能部分阻断转化生长因子-β/Smads信号传导通路在大鼠肾小球系膜细胞的激活,抑制 I 型胶原分泌及肾小球系膜细胞增殖,其抑制作用呈一定的时间依赖性关系.

关键词：肾小球系膜细胞、I、型胶原蛋白、转化生长因子-β1、Smad蛋白、血管紧张素转化酶抑制剂

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分类号：R36;R69

资助基金：广州市卫生局科研基金项目2009-YB-028;广东省医学科研基金项目A2010450

在线出版日期：2015-04-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：303-309