嘌呤霉素损伤小鼠肾小球足细胞系中podocin表达与分布的影响及其意义

摘要：

目的 Podocin是构成肾小球足细胞裂孔隔膜(slit diaphragm,SD)完整性的重要分子,其表达异常与大量蛋白尿的形成有关.本研究采用体外培养肾小球足细胞系,探讨足细胞损伤过程中,podocin mRNA表达和分布变化与足细胞损伤的关系.方法 将体外培养的足细胞采用随机数字表法设立为实验组与对照组.实验组采用嘌呤霉素(puromycin aminonucleoside,PAN) 刺激(剂量为50 μg/mL), 分别于8 h,24 h和48 h观察细胞形态、提取总RNA和细胞免疫组化观察podocin的分布.对照组用含10% FBS的RPMI 1640培养液培养.细胞图像应用Image J图像处理软件,计算实验组与对照组在上述各时间点200倍镜下随机选择的30个细胞的相对面积,半定量RT-PCR和间接免疫荧光法检测podocin mRNA表达和分布变化.结果 对照组呈星形伸出树枝状突起,相邻细胞间形成相互连接.实验组细胞体缩小,足突回缩、消失, 细胞间失去相互连接.上述各时间点两组间podocin mRNA表达比较,差异无显著意义(P>0.05).Podocin在对照组呈细丝状均匀分布于细胞核膜、细胞质及细胞膜;在实验组主要沿细胞核膜呈点线样分布,刺激后8 h和24 h细胞质有少许分布,刺激48 h后出现细胞膜、细胞质分布缺失.结论 Podocin分布异常与足细胞损伤密切相关,损伤早期即有变化;podocin分布异常是足细胞损伤过程中的重要分子效应.

关键词：足细胞系、podocin、嘌呤霉素

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分类号：R69;R3

资助基金：广东省自然科学基金项目5000424;广东省科技计划项目2005B36001019;广州市科技攻关计划项目资助2006Z3-E0231

在线出版日期：2009-05-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：8-11