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10.3760/cma.j.issn.1004-4221.2020.01.013

沉默LncRNA OIP5-AS1通过上调miR-34c-5p表达增加A549R细胞放射敏感性

引用
目的 探讨LncRNA OIP5-AS1对非小细胞肺癌放射抗拒细胞A549R的放射敏感性影响及作用机制.方法 X射线6Gy照射5次A549细胞建立放射抗拒细胞A549R.qRT-PCR检测A549、A549R细胞OIP5-AS1和miR-34c-5p表达水平.转染OIP5-AS1抑制剂或miR-34c-5p模拟物至A549R细胞,OIP5-AS1过表达质粒至A549细胞.流式细胞仪检测细胞凋亡,克隆形成实验检测细胞放射敏感性,蛋白印记检测p-Chk2和p-ATM蛋白表达水平.双荧光素酶实验验证OIP5-AS1与miR-34c-5p之间关系.结果 与A549细胞比,A549R细胞中OIP5-AS1表达上调(1.97±0.11:1.01±0.05,P<0.05),miR-34c-5p表达下调(0.43±0.02:1.02±0.06,P<0.05).沉默OIP5-AS1 +6 Gy组A549R细胞中p-Chk2和p-ATM蛋白水平低于沉默对照+6Gy组(0.43±0.03:1.39±0.15和0.51±0.05:1.21±0.11,P<0.05),但凋亡率增加[(13.29±1.25)%:(28.47±2.31)%,P<0.05].过表达OIP5-AS1 +6 Gy组A549细胞中p-Chk2和p-ATM蛋白水平高于过表达对照+6Gy组(1.23±0.13:0.75±0.06和1.08±0.11:0.59±0.04,P<0.05).抑制miR-34c-5p表达逆转了沉默OIP5-AS1对A549R细胞存活分数影响,增敏比为1.42.OIP5-AS1负调控miR-34c-5p表达.结论 沉默OIP5-AS1通过上调miR-34c-5p表达增强A549R细胞放射敏感性,为放疗提供潜在的靶点.

A549细胞系、A549R细胞系、OIP5-AS1基因、miR-34c-5p基因、放射敏感性

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2020-04-10(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)

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