阿帕替尼对食管鳞癌ECA-109细胞及其干性细胞辐射敏感性的影响及机制探讨

摘要：

目的 探索阿帕替尼对食管鳞癌ECA-109细胞及其干性细胞辐射敏感性的影响及其分子机制.方法 采用无血清悬浮培养法富集细胞中富含肿瘤干性细胞群的球囊.将ECA-109及其干性细胞分为细胞对照组、单纯药物组、单纯照射组以及药物+照射组.CCK-8法测定细胞增殖的变化,酶联免疫吸附法(E LISA)测定血管内皮生长因子(VEGF)蛋白的浓度,流式细胞术分析细胞周期及凋亡的变化;Western blot法测定细胞中CHK2、P-STAT3蛋白的表达.结果 阿帕替尼作用于ECA-109亲本细胞及干性细胞24、48和72 h后,ECA-109干性细胞的药物半数抑制浓度(IC50)均较其亲本细胞的药物半数抑制浓度(IC50)明显升高(t=8.17、9.29、18.85,P＜0.05),且其细胞抑制表达呈时间-剂量效应关系(亲本细胞:r2 =0.94～0.97,P＜0.05;干性细胞:r2 =0.94～0.98,P＜0.05);不同浓度阿帕替尼(亲本细胞:10和20 μmol/L;干性细胞:30和40 μmol/L)联合不同剂量X射线(6和8 Gy)照射后,ECA-109亲本细胞及干性细胞的增殖抑制率均较单纯照射组明显增强(t=5.20 ～39.68,P＜0.05).ECA-109亲本细胞及干性细胞的VEGF蛋白水平差异具有统计学意义(t=7.45,P＜0.05),且单纯药物组(20μmol/L)及药物+照射组(20 μmol/L,6 Gy)处理后,两种细胞VEGF蛋白水平均有所下降,其中亲本细胞差异具有统计学意义(t=14.51、26.40,P ＜0.05).药物+照射组ECA-109亲本细胞的G2/M期及凋亡细胞比例均较细胞对照组增高(t=8.83,11.59,P＜0.05);与细胞对照组(0 μmol/L)比较,单纯药物组的ECA-109亲本细胞CHK2、P-STAT3蛋白的表达水平显著下降(t=3.36、4.10,P＜0.05);与单纯照射组比较,药物+照射组ECA-109亲本细胞CHK2,P-STAT3蛋白的表达水平也显著下降(=9.05、2.36,P＜0.05).结论 阿帕替尼能增强食管癌ECA-109亲本细胞及其干性细胞的放射敏感性,ECA-109干性细胞放射抵抗的原因可能与干性细胞更高表达VEGF蛋白有关.

关键词：食管癌、阿帕替尼、血管内皮生长因子、辐射增敏

所属期刊栏目：38

资助基金：国家自然科学基金11705095本研究接受常州市科技支撑社会发展项目CE20165024;常州市高层次卫生人才项目2016C2BJ007;常州市科技局应用基础研究项目CJ20159050;江苏省卫生厅指导性科研项目Z201220;常州市科技支撑社会发展项目CE20125021的资助.National Natural Science Foundation of China11705095

在线出版日期：2018-05-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：161-167