涂覆承载质粒DNA水凝胶的覆膜血管内支架置入主动脉局部基因转染的实验研究

摘要：

目的 用部分覆膜血管内支架涂覆阳离子胶原水凝胶(CGH)承载质粒DNA实现主动脉局部的基因转染,为核酸等大分子治疗物质经血管导入提供理论依据.方法 将CGH涂覆于部分覆膜血管内支架的覆膜织物上,以CGH涂层分别承载2种质粒DNA,即编码β-半乳糖苷酶的pCAGGS-LacZ或编码增强绿色荧光蛋白的pEGFP.8只实验兔为日本白色家兔,在主动脉经球囊拖拉损伤4周后置入2枚血管内覆膜支架,分别承载pCAGGS-LacZ和pEGFP.因2枚支架承载的质粒DNA不同,转染后转录的mRNA和表达的蛋白不同,所以2枚血管内覆膜支架置入部位主动脉互为阴性对照.术后3 d对基因转染和表达进行评估.pCAGGS-LacZ的转染和表达通过特异性x-gal染色和反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测.pEGFP的转染和表达通过免疫荧光显微镜观察.结果 在承载pCAGGS桳acZ的CGH涂层部分覆膜血管内支架置入部位的主动脉,尤其是金属支架支杆对覆膜材料支撑良好处主动脉局部x梘al染色阳性,RT桺CR可检测到编码β-半乳糖苷酶的mRNA;免疫荧光显微镜观察未见绿色荧光,该处主动脉近端及远端x-gal染色及RT-PCR结果均为阴性.其他器官,如脑、心、肝、RT.PCR结果均为阴性.在承载pEGFP的CGH涂层部分覆膜血管内支架置入部位主动脉局部,免疫荧光显微镜可观察到绿色荧光;x梘al染色阴性,RT-PCR未检测到编码β-半乳糖苷酶的mRNA.结论 CGH涂层部分覆膜血管内支架置入兔主动脉内,可实现主动脉局部的瞬时基因转染与表达.

关键词：主动脉、转基因、支架、血管假体植入、组织工程

所属期刊栏目：42

分类号：R3(基础医学)

在线出版日期：2008-07-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：645-649