人转化铁受体基因的克隆和表达

摘要：

目的 探讨人转化铁受体基因(hTfR)克隆和高效表达的方法及临床意义.方法 用RT-PCR法从人胚肝、肺组织中克隆hTfR基因,构建重组表达质粒pcDNA3-hTfR和pEGFP-C1-hTfR,转染人胚肾上皮HEK293细胞.用Western印迹法检测pcDNA3-hTfR转染HEK293细胞后hTfR蛋白的表达情况;用荧光显微镜和共聚焦荧光显微镜观察重组pEGFP-C1-hTfR质粒转染HEK293细胞后hTfR蛋白的表达水平及亚细胞定位.结果 经过DNA测序证实,克隆的hTfR基因为全长cDNA序列(2332 bp).Western印迹法检测到转染细胞能有效表达190×103的hTfR蛋白,荧光显微镜和共聚焦荧光显微镜观察到绿色荧光蛋白(GFP)-hTfR融合蛋白主要定位于细胞膜.结论 从人胚肝、肺组织中可以成功克隆hTfR基因,该基因转染HEK293细胞后可获得hTfR蛋白的高效表达.hTfR主要定位于细胞膜.

关键词：受体、细胞表面、基因表达、评价研究

所属期刊栏目：41

分类号：R4(临床医学)

资助基金：国家高技术研究发展计划863计划20060102A4002;广东省广州市科技计划2006Z3-D2041;教育部高等学校博士学科点专项科研基金20040558093;广东省自然科学基金5000136

在线出版日期：2007-12-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：535-538