急性消化成年兔膝关节软骨单位与软骨细胞基因表达分析

摘要：

目的:探讨急性消化成年兔膝关节软骨单位和软骨细胞基因表达的差异。方法:8月龄新西兰兔5只，无菌条件剖取双膝关节股骨髁全层软骨组织，左侧膝关节软骨组织采用0.4%Pronase酶和0.025%Ⅱ型胶原酶依次酶解消化获取软骨细胞，右侧膝关节软骨组织采用0.3%dispase酶和0.2%Ⅱ型胶原酶联合搅拌酶解消化3 h获取兔膝关节骨单位。通过实时定量PCR对急性消化软骨细胞和软骨单位基因表达进行分析，包括基质蛋白[聚集蛋白聚糖（Agg）、胶原蛋白（Col）-2、Col-6A6、Col-10、Col-11]、MMPs及MMPs抑制因子（TIMPs）（MMP-1、MMP-3、MMP-9、MMP-13、TIMP-1、TIMP-2、TIMP-3）、性别决定区Y-框蛋白9（Sox）-9及细胞骨架蛋白（黏着斑蛋白、微管蛋白、肌动蛋白）、炎症因子（IL-1β、TNF-α）。采用SPSS 16.0统计软件进行分析，采用
t检验，以
P<0.05表示差异具有统计学意义。
结果:与软骨细胞相比，软骨单位中Agg[（5.78±0.90）与（1.89±0.27），
t=9.26，
P<0.001]、Col-2[（6.29±0.76）与（3.06±0.60），
t=7.46，
P<0.001]、Col-6A6[（0.89±0.18）与（0.22±0.06），
t=7.90，
P<0.001]、Col-10[（3.83±0.76）与（1.00±0.26），
t=7.88，
P<0.001]及TIMP-1[（1.98±0.85）与（1.03±0.34），
t=2.32，
P=0.049]、TIMP-2[（3.46±1.50）与（1.52±1.06，
t=2.36，
P=0.046]、TIMP-3 [（3.96±0.50）与（1.36±0.18），
t=10.94，
P<0.001]、Sox-9[（7.09±2.93）与（3.24±0.77），
t=2.84，
P=0.022]、黏着斑蛋白[（3.42±1.69）与（1.46±0.68），
t=2.41，
P=0.043]、微管蛋白（9.34±0.71）与（2.35±0.80），
t=14.61，
P<0.001]表达较高，差异具有统计学意义。与软骨细胞相比，在软骨单位中MMP-1[（1.02±0.30）与（2.67±0.45），
t=6.91，
P<0.001]、MMP-3[（1.21±0.32）与（2.52±0.79），
t=3.44，
P=0.009]、MMP-13[（1.23±0.34）与（3.42±0.86），
t=5.30，
P=0.007]、IL-1β[（1.02±0.14）与（2.70±0.49），
t=7.37，
P<0.001]、TNF-α[（0.99±0.08）与（3.15±0.54），
t=8.85，
P<0.001]表达低，差异具有统计学意义。Col-11、MMP-9、肌动蛋白在软骨单位及软骨细胞中表达差异无统计学意义（
P>0.05）。
结论:与单纯软骨细胞相比，急性消化软骨单位细胞外基质成分基因表达增高，基质金属蛋白酶和细胞炎症因子表达降低，提示软骨单位在组织工程软骨修复中的生物学优势。

关键词：软骨细胞、细胞外基质、基质金属蛋白酶类、软骨单位

所属期刊栏目：27

资助基金：国家自然科学基金项目U21A20353，82172503;山西省重点研发计划项目201903D421019;中央引导地方科技发展资金YDZJSX2022B011;National Natural Science Foundation of ChinaU21A20353, 82172503;Key R&D Program of Shanxi ProvinceInternational Cooperation, 201903D421019;The Central Government Guides Local Science and Technology Development FundsYDZJSX2022B011

在线出版日期：2024-01-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：459-463